[发明专利]一种DNA模板快速制备方法在审
| 申请号： | 201810677472.9 | 申请日： | 2018-06-27 |
| 公开（公告）号： | CN108795926A | 公开（公告）日： | 2018-11-13 |
| 发明（设计）人： | 李智敏;严准;刘云云;余永廷;曾粮斌;高春生;陈佳;程毅;郭利桃;孙向平 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院麻类研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 长沙永星专利商标事务所(普通合伙) 43001 | 代理人： | 周咏 |
| 地址： | 410205 湖南*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 样品分散液 快速制备 沸水浴 沉淀物溶解 混合溶液 离心处理 上层清液 去除 制备 丙醇 裂解细胞 双重作用 低级醇 乙醇 醇类 甲醇 沉淀 全程 | ||
1.一种DNA模板快速制备方法，其特征在于包括：
在样品分散液中加入KOH溶液，得到混合溶液；
将混合溶液进行沸水浴处理，然后进行离心处理，去除上层清液，将沉淀物溶解，得到DNA模板溶液；或者
在样品分散液中加入KOH溶液，得到混合溶液；
将混合溶液进行沸水浴处理，加入Tris-HCl溶液和醇类，然后进行离心处理，去除上层清液，将沉淀物溶解，得到DNA模板溶液。
2.根据权利要求1所述的DNA模板快速制备方法，其特征在于，所述混合溶液中KOH的浓度为0.05～0.5M。
3.根据权利要求1所述的DNA模板快速制备方法，其特征在于，所述醇类优选为异丙醇。
4.根据权利要求1所述的DNA模板快速制备方法，其特征在于，所述样品分散液为细胞培养液或把非液体样品分散在无菌水中。
5.根据权利要求1所述的DNA模板快速制备方法，其特征在于，所述沸水浴处理时间为5～30min。
6.根据权利要求1所述的DNA模板快速制备方法，其特征在于，所述Tris-HCl溶液加入到混合液中后的终浓度为0.1M～1M，醇类加入到混合液中后的最终体积浓度为30～60％，加入Tris-HCl溶液和醇类后混合溶液的pH为7.0～9.5。
7.根据权利要求1所述的DNA模板快速制备方法，其特征在于，所述离心处理通过离心机沉淀。
8.根据权利要求7所述的DNA模板快速制备方法，其特征在于，所述离心处理的离心力为13000～18000×g，离心时间为2～20min。
9.根据权利要求8所述的DNA模板快速制备方法，其特征在于，所述离心处理的离心力为16000×g，离心时间为10min。
10.根据权利要求1～3中任一项所述的DNA模板快速制备方法，其特征在于，所述DNA模板溶液可直接用于PCR反应或置于-20℃备用。
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