[发明专利]一种金鸡纳碱季铵盐共沉淀制备高纯度大蒜多糖的方法

说明书

本发明属于植物化学技术领域，具体涉及一种金鸡纳碱季铵盐共沉淀制备高纯度大蒜多糖的方法。本发明采用金鸡纳碱季铵盐作为沉淀剂与大蒜多糖形成沉淀物，沉淀物在无机盐水溶液中进行解离，超滤得解离液，对解离液进行醇析得高纯度大蒜多糖，分子量分布成正态分布，平均分子量为4380Da。本发明提取方法简单，易于控制，各工序均具有关键的质量控制点，利于生产放大。

技术领域

本发明属于植物化学技术领域，具体涉及一种金鸡纳碱季铵盐共沉淀制备高纯度大蒜多糖的方法。

背景技术

大蒜多糖是大蒜中含量最高的保健功能成分，占鲜蒜的15％～25％，具有增殖肠道益生菌，协助消化、增强免疫力、防止肝损伤、抗氧化和抗病毒等多种功效。大蒜多糖在医药、食品等领域具有较广泛的实际应用前景。

目前，大蒜多糖的提取方法主要有热水、稀盐、稀碱和稀酸提取，也有用复合酶处理、超声辅助加速多糖释放的提取方法。热水浸提法是一种常用的提取植物多糖的方法，其优点是成本低廉、工艺简单、无需特殊仪器设备，可用于大规模生产，其缺点是提取工艺时间长。酶法提取是采用酶与热水浸提相结合的方法，有复合酶法和单一酶法。常用的酶有蛋白酶、纤维素酶、果胶酶等。酶法提取植物多糖具有反应条件温和、提取率高、杂质易除、提取时间短，工艺简便，而且能保持多糖的天然活性，但有些酶的价格较高，使用的条件比较苛刻。酸碱提取法是利用在稀酸或稀碱作用下，植物或菌类的细胞、细胞壁被充分溶胀以致破裂，使其中游离的多糖增加，更易溶解在稀酸或碱水溶液中，利用这一特性可提高此类多糖的提取率。而且传统的大蒜多糖提取方法往往需要多次除蛋白、除果胶、乙醇沉降、凝胶柱纯化、透析等一系列复杂的纯化工序才能制备出高纯度的大蒜多糖，制备工序及其繁琐。

相比于传统的大蒜多糖提取方法，近年来新兴了一些新技术，如超临界CO₂萃取技术；CN 1818045 A公开了一种采用超临界CO₂从鲜蒜中同时提取大蒜油和大蒜多糖的方法，该工艺参数虽然简单，工艺绿色环保，但是分离过程需要在高压下进行，设备一次性投资过大，萃取无法连续进行，造成设备的有效产率低。采用季铵盐与酸性多糖成盐形成水不溶性化合物来进行纯化是一种简便的纯化方法，常用的季铵盐为十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)及其十六烷基三甲基氢氧化铵(CTA-OH)和氯化十六烷基吡啶(CPC)，但是其成盐后不容易解离，导致多糖收率低。

因此，开发简洁高效的、适合工业化生产的大蒜多糖分离提取法是非常必要的。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术中的不足，提供一种大蒜多糖的分离纯化方法，本发明首次采用金鸡纳碱季铵盐作为沉淀剂与大蒜多糖形成沉淀物，沉淀物在无机盐水溶液中进行解离，超滤得解离液，对解离液进行醇析得高纯度大蒜多糖。本发明提取方法简单，易于控制，各工序均具有关键的质量控制点，利于生产放大。

根据本发明的一个方面，本发提供了一种金鸡纳碱季铵盐共沉淀制备高纯度大蒜多糖的方法，包括以下步骤：

1)脱脂前处理：对大蒜去皮后干燥粉碎，采用丙酮和四氢呋喃的混合液对粉碎后的大蒜进行脱脂处理得初级蒜渣；

2)低温超声去除小分子糖：将经过脱脂处理的初级蒜渣在90％V的乙醇水溶液中超声去除小分子糖得脱糖二级蒜渣；

3)大蒜多糖的分级提取：对脱糖二级蒜渣依次在中性、弱酸性、弱碱性的水中进行提取大蒜多糖得含大蒜多糖的提取液；

4)大蒜多糖粗品的分离：对含大蒜多糖的提取液采用醇析得大蒜多糖粗品；

5)大蒜多糖粗品的纯化：将大蒜多糖粗品依次脱色、脱蛋白后溶于纯化水中加入金鸡纳碱季铵盐形成不溶物沉淀，离心得沉淀物，沉淀物在无机盐水溶液中进行解离，超滤得解离液，对解离液进行醇析得高纯度大蒜多糖。

根据本发明所述的提取方法，具体步骤为：