[发明专利]一种雷替曲塞pH敏感脂质体及制备方法

说明书

本发明公开了一种雷替曲塞pH敏感脂质体及制备方法。本发明所制备的雷替曲塞pH敏感脂质体初次所得包封率在45.75％～49.95％之间，最终所得包封率可达89.45％～95.23％；质地为白色泛蓝色乳光的混悬液体，且粒径均一分散性良好；Zeta电位在‑46.6mv～‑42.5mv之间，稳定性优异；粒径在217nm～278nm，适合用作给药的载体；在体外释放实验中，所得脂质体在肿瘤组织的酸性环境(pH5.0～6.5)释放快速，在正常组织液环境(pH7.4)中释放缓慢，pH敏感作用明显；细胞毒性实验表明，所得脂质体抗结肠癌细胞效果优异，能够有效地靶向到肿瘤组织；并且保证空白脂质体无毒性，毒副作用少。

技术领域

本发明涉及脂质体领域和肿瘤组织内pH响应的被动靶向领域，具体涉及一种雷替曲塞pH敏感脂质体及制备方法。

背景技术

雷替曲塞是一种喹唑啉叶酸盐类似物，通过抑制胸腺嘧啶合成酶(TS)而发挥抗肿瘤作用，其抗肿瘤作用不仅来源于药物本身，药物进入机体后，48h内只有40％～50％以原型药物被排泄，一部分药物通过还原型叶酸甲氨蝶呤细胞膜载体被细胞主动摄取，被叶酸聚谷氨酸合成酶代谢成一系列多聚谷氨酸类化合物，此类化合物对胸苷酸合酶有着更强的抑制作用，且能长时间滞留在细胞内，发挥长期毒性。与5-FU相比，雷替曲塞具有更强的抗人结肠癌肿瘤细胞的活性，现今已有16个国家将其作为结直肠癌一线用药。

雷替曲塞的半衰期长达198h，因此在使用过程中有较长的化疗间歇期，每3周用药1次，目前国内外的上市制剂为静脉注射用冻干粉针。虽然其静脉注射用冻干粉针的临床应用越来越广泛，但也具有明显局限性。由于不能有效地区分正常细胞和快速增殖的肿瘤细胞，使其到达肿瘤组织的药量较少、不良反应较大，从雷替曲塞治疗晚期结直肠癌的临床试验中可以发现，单药雷替曲塞一线或二线治疗的主要不良反应为白细胞减少、中性粒细胞减少、恶心、呕吐、乏力、厌食以及谷丙转氨酶升高，发生率分别为9％～13.8％、23％、20％、6.9％～9％、14％和7％。因此，寻找降低毒副作用提高疗效的方法成为了亟待解决的问题。

由于较高的代谢速率，肿瘤微环境和炎症组织的pH值为5.0～6.5，细胞内不同细胞器的pH值亦不同，如核内体(Endosome)的pH值为5.5、溶酶体(Lysosome)的pH值为5.0，这些不同pH值的微环境为pH响应高分子纳米粒子的设计提供了思路。pH敏感型脂质体是能够有效的在特定时间和特定部位释放所包封药物的一种新型药物载体，因其具有良好的生物相容性、靶向性、缓释性、降低药物的毒性和提高药物的稳定性等作用而被广泛关注。

虽然pH敏感脂质体已有一定报道，但目前本领域并没有将雷替曲塞制备为pH敏感脂质体的研究，采用雷替曲塞制备pH敏感脂质体时，为了保证其能够有效地靶向到肿瘤组织、降低药物的毒副反应，更好地发挥其抗肿瘤作用，必须要保证雷替曲塞脂质体具有良好的包封率、pH敏感性及稳定性，但满足这三者是极其困难的。

中国专利CN 2011102286230公布了一种抗肿瘤pH敏感脂质体、其冻干粉针制剂及它们的制备方法，虽然其制备出的脂质体最终所得包封率在60％～90％之间，但其包封率变化幅度大，稳定性差，导致其难以工业化生产使用。

因此如何提供一种包封率高、敏感性强、稳定性好、品质优异的雷替曲塞脂质体是本领域亟待解决的问题。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种包封率高、敏感性强、稳定性好的雷替曲塞脂质体。

本发明公开了一种雷替曲塞pH敏感脂质体，所述雷替曲塞pH敏感脂质体，按重量份数计，包括以下组分：雷替曲塞5～15份、磷脂酰乙醇胺35～105份、胆固醇琥珀酸酯15～45份。