[发明专利]基于RT-LAMP检测SFTSV的引物组及试剂盒在审
| 申请号： | 201810683300.2 | 申请日： | 2018-06-28 |
| 公开（公告）号： | CN108754029A | 公开（公告）日： | 2018-11-06 |
| 发明（设计）人： | 张瑞玲;张忠;苑广盈;王丽 | 申请（专利权）人： | 泰山医学院 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司： | 成都方圆聿联专利代理事务所(普通合伙) 51241 | 代理人： | 李鹏 |
| 地址： | 271016 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 核苷酸序列 环引物 外引物 内引物FIP 快速检测 试剂盒 发热伴血小板减少综合征病毒 试剂盒操作 血小板减少 综合症病毒 内引物BIP 寡核苷酸 灵敏度 引物组 发热 观察 | ||
1.基于RT-LAMP快速检测发热伴血小板减少综合症病毒的寡核苷酸，包括外引物F3和B3、内引物FIP和BIP、环引物LoopF和LoopB，其中：
外引物F3的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，外引物B3的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；内引物FIP的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，内引物BIP的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示；环引物LoopF的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示，环引物LoopB的核苷酸序列如SEQ IDNo.6所示。
2.基于RT-LAMP快速检测发热伴血小板减少综合症病毒的试剂盒，其特征在于，包括以下组分：
(1)权利要求1所示的外引物F3和外引物B3、内引物FIP和内引物BIP、环引物LoopF和环引物LoopB；
(2)LAMP扩增预混液、钙黄绿素和无菌蒸馏水。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，包括以下组分：外引物F3和外引物B3各10μmol/L、内引物FIP和内引物BIP各10μmol/L、环引物LoopF和环引物LoopB各10μmol/L、2.5mmol/L的dNTPs、5mmol/L的甜菜碱、100mmol/L的MgSO4、25mmol/L的MnCl2、8U/μL的Bst聚合酶、10U/μL的AMV的反转录酶。
4.使用权利要求2或3所示的试剂盒非诊断目检测发热伴血小板减少综合症病毒的的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)提取样本RNA；
(2)将步骤(1)提取的样本RNA加入试剂盒中，进行环介导恒温扩增；
(3)检测步骤(2)得到的扩增产物，进行结果判定。
5.根据权利要求4所示的方法，其特征在于，步骤(2)中，环介导恒温扩增反应条件为：63℃恒温反应40min。
6.根据权利要求4所示的方法，其特征在于，步骤(3)中，对扩增产物的检测采用荧光显色法。
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