[发明专利]一种利用烟叶残渣制备生物菌肥的方法

权利要求书

1.一种利用烟叶残渣制备生物菌肥的方法，其特征在于，包括以烟叶残渣为固态培养基，接种混合菌种进行固态培养的步骤；其中，所述的固态培养基是烟叶残渣与水按照质量比1∶1.2～2.0的混合物，所述的混合菌种是枯草芽孢杆菌（ Bacillus subtilis ） 、胶质芽孢杆菌（ Bacillus mucilaginosus ） 和淡紫拟青霉菌（ Paecilomyces lilacinus ）的混合物；

所述的混合菌种中，根据活菌数计算，胶质芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉菌的比例是1～10∶1～10∶1；

所述的混合菌种通过混合三种微生物的种子培养液获得；

所述种子培养液的制备方法是：将三种微生物分别接入其种子培养基，150～200r/min、30～37℃摇床培养至OD₆₂₀为4～6，其中：

胶质芽孢杆菌的种子培养基为含0.2～1g/100ml磷酸铵的糖蜜5～50倍稀释液；

枯草芽孢杆菌种子培养基为糖蜜5～50倍稀释液；

淡紫拟青霉菌种子培养基为糖蜜5～50倍稀释液。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的混合菌种接种量为固态培养基总质量的1～15％。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的固态培养的培养时间为7～15天，每隔24～48h翻料一次，培养温度为10～37℃。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的烟叶残渣是烟叶经活性物质提取后的残渣，按照干燥残渣重量计，烟叶残渣中，烟碱含量不超过0.5mg/g，茄尼醇含量不超过0.2mg/g，绿原酸含量不超过0.5mg/g。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的烟叶残渣通过下述方法制备：将粉碎后的干燥烟叶与90％的乙醇水溶液按照料液质量比1:5～10混合，于50-80℃热回流处理0.5小时，重复1-5次，提取后的残渣脱除乙醇并干燥。