[发明专利]番木瓜环斑病毒西瓜株系弱毒疫苗的研制及其应用有效

专利信息
申请号: 201810684725.5 申请日: 2018-06-28
公开(公告)号: CN108823174B 公开(公告)日: 2021-07-20
发明(设计)人: 李向东;黄显德;田延平;王玉;耿超 申请(专利权)人: 山东农业大学
主分类号: C12N7/00 分类号: C12N7/00;C07K14/08;A01G13/00
代理公司: 济南誉丰专利代理事务所(普通合伙企业) 37240 代理人: 李茜
地址: 271018 *** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 番木瓜 环斑 病毒 西瓜 株系弱毒 疫苗 研制 及其 应用
【权利要求书】:

1.番木瓜环斑病毒西瓜株系(Papaya ringspot virus-watermelon strain,PRSV-W)弱毒突变体在防治PRSV-W强毒株系侵染方面的应用;

所述番木瓜环斑病毒西瓜株系弱毒突变体包括:弱毒突变体K125D、弱毒突变体G317K和弱毒突变体N137A;

弱毒突变体K125D是番木瓜环斑病毒西瓜株系辅助成分-蛋白酶HC-Pro基因编码的蛋白第125位氨基酸由K突变为D,其氨基酸序列如SEQ ID NO.21所示;弱毒突变体G317K是番木瓜环斑病毒西瓜株系HC-Pro基因编码的蛋白第317位氨基酸由G突变为K,其氨基酸序列如SEQ ID NO.22所示;弱毒突变体N137A是番木瓜环斑病毒西瓜株系HC-Pro基因编码的蛋白第137位氨基酸由N突变为A,其氨基酸序列如SEQ ID NO.23所示。

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述防治PRSV-W强毒株系侵染是通过提供交叉保护作用实现的。

3.一种番木瓜环斑病毒西瓜株系弱毒疫苗,其特征在于,其有效成分为权利要求1所述的番木瓜环斑病毒西瓜株系弱毒突变体。

4.根据权利要求3所述的番木瓜环斑病毒西瓜株系弱毒疫苗,其特征在于,可通过以下步骤获得:

利用PCR技术在PRSV-W的辅助成分-蛋白酶HC-Pro基因中定点引入突变以获得突变体K125D、G317K和N137A,突变体的辅助成分-蛋白酶HC-Pro基因编码的氨基酸序列分别如SEQID NO.21、SEQ ID NO.22和SEQ ID NO.23所示;接种寄主植物筛选得到HC-Pro第125位、317位和137位氨基酸发生突变的弱毒疫苗K125D、G317K和N137A。

5.权利要求3或4所述的番木瓜环斑病毒西瓜株系弱毒疫苗在防治PRSV-W强毒株系侵染方面的应用。

6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,番木瓜环斑病毒西瓜株系弱毒疫苗K125D或G317K可以交叉保护甜瓜植株免受PRSV-W强毒株系的侵染。

7.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,番木瓜环斑病毒西瓜株系弱毒疫苗N137A可以交叉保护西葫芦植株免受PRSV-W强毒株系的侵染。

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