[发明专利]一种基于交联水凝胶的总抗氧化能力的评价方法

说明书

本发明公开了一种基于交联水凝胶的总抗氧化能力的评价方法。该评价方法通过多聚糖‑金属离子水凝胶的制备；低浓度活性氧簇制备；金属离子在解聚过程中电化学氧化还原测定；分析金属探针信号和总抗氧化性能间的关系；最后实现对实例样品的总抗氧化性能进行评价。该方法简便、廉价，能够实现对抗氧化剂总抗氧化能力的高效检测分析。

技术领域

本发明属于电化学检测技术领域，具体涉及一种基于交联水凝胶的总抗氧化能力的评价方法。

背景技术

上世纪40年代，壳牌公司的物理化学家Denham Harman试图开始寻找人类衰老的机制。在1956年，他发表了著名的论文《Aging:a theory based on free radical andradiation chemistry》，认为生物体的衰老过程是组织细胞不断产生的活性氧簇积累所致。之后，他又进一步提出抗氧化剂可以减缓衰老的理论。生物体中自身有着一套由抗氧化的代谢产物和酶构成的复杂系统，通过由抗氧化作用的代谢中间体和产物与酶之间的协同作用使得重要的细胞成分比如DNA、蛋白质和脂类免受氧化损伤。然而生物体内若是活性氧簇成分与抗氧化系统之间平衡失调，则会引起氧化应激，而氧化应激被认为是引起多种疾病例如类风湿性关节炎和帕金森氏症的原因之一。因此，在各种保健措施中，服用抗氧化剂和食用富含天然抗氧化剂的蔬菜水果被认为拥有延缓衰老的功效。其中总抗氧化能力业已成为衡量食品、果汁和添加剂抗氧化能力的一项重要指标。但近些年来，很多研究也发现了截然相反的意见，过多的摄入抗氧化剂可能会带来健康的风险。例如浙江大学医学院免疫学研究所鲁林荣教授课题组从免疫学的角度出发，发现补充摄入抗氧化剂存在促进自身性免疫疾病的发生发展的风险。虽然学术界对于抗氧化剂的作用一直存在争议，但无论其对健康有益还是有害，建立一种高效检测总抗氧化能力的方法在营养学、药理学、生理学和食品加工等领域都已有了广泛的需求。

现今，对于总抗氧化能力的常规检测方法包括了氧自由基吸收能力检测、总氧化剂清楚能力检测、ROO·致β-胡萝卜素褪色法、铁离子还原能力测定和 Folin-Ciocalteu比色法等。这些以光学手段为主的检测方法一般拥有着一些难以克服的缺点，比如需要较长的检测时间、需对检测样品事先进行脱色处理以及抗干扰能力的不足。酶法检测和最新型的DNA损伤法可以有效地解决干扰物的影响，并且提供更为灵敏的型号，但酶和DNA较容易失活，价格也较为昂贵，并且不易稳定固载于电极表面。

相比之下，利用电化学方法进行总抗氧化能力检测由于其检测仪器廉价、检测信号灵敏、可实现携带检测，成为了备受期待的替代方法。其中直接电极检测法和化学修饰电极检测法容易受到复杂样品中其他成分的干扰，较适用于评估单一氧化剂的抗氧化能力。例如中国专利申请CN201210098387.X公开了一种快速检测蜂产品的抗氧化性能的电化学方法，其以没食子酸为标准品，通过待测溶液的氧化还原电流峰值的大小来确定其抗氧化物质含量。

发明内容

本发明的目的针对电化学检测总抗氧化能力实用性不足的现状，提供一种基于交联水凝胶的总抗氧化能力的评价方法，该方法简便、廉价，能够实现对抗氧化剂总抗氧化能力的高效检测分析。

为了达到上述的目的，本发明采取以下技术方案：

一种基于交联水凝胶的总抗氧化能力的评价方法，包括如下步骤：

步骤(1)：多聚糖-金属离子水凝胶的制备：

将多聚糖均匀分散于溶剂中，然后向多聚糖分散液中添加一定浓度的金属前驱体盐溶液，搅拌，得到多聚糖-金属离子交联水凝胶；

步骤(2)：低浓度活性氧簇制备技术：

混合过氧化氢和硫酸亚铁溶液制备低浓度活性氧簇；

步骤(3)：金属离子在解聚过程中电化学氧化还原测定：

利用循环伏安扫描测定多聚糖-金属离子交联水凝胶中金属离子氧化还原电流值；