[发明专利]一株高产灵菌红素海洋细菌分离鉴定与应用

说明书

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一株海洋细菌分离鉴定及其应用。该海洋细菌命名为Notoacmeibacter marinus IMDGXO 109，保藏号为CCTCC NO：M 2018148；保藏地点为：中国，武汉，武汉大学，中国典型培养物保藏中心，保藏时间为2018年03月22日。通过本申请的操作步骤能提高该菌种目的产物灵菌红素的产率和稳定性，所产的代谢产物纯度高、安全性好，可以应用于医药行业。

【技术领域】

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一株高产灵菌红素海洋细菌分离鉴定与应用。

【背景技术】

微生物所产次级代谢产物不是其在生长和繁殖所必须的物质(色素、抗生素、毒素、和激素等)，但对人类活动有着非常重要的研究价值和意义。灵菌红素广泛存在于自然界中，具有抗菌、抗肿瘤、抗疟疾和免疫抑制等多种生物活性，因此，在医药药品行业等具有很好的应用价值和市场前景。

目前，国内外有关海洋细菌产灵菌红素的微生物，新型菌株的筛选报道较少。国内外对灵菌红素的研究主要集中在沙雷氏菌发酵工艺的优化及其在免疫学功能等方面有着比较丰富的研究。但沙雷氏菌并非优秀的生产菌种，且是一种条件致病菌，灵菌红素其产量比较低且受到分离纯化技术的影响，难以实现工业大规模的发酵和生产。因此，从自然界筛选生产单一结构灵菌红素的新型菌株，并鉴定其在系统分类学上的归属且菌株能高产灵菌红素的研究。

【发明内容】

鉴于上述内容，一株高产灵菌红素海洋细菌分离鉴定与应用。为达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：

一株高产灵菌红素海洋细菌，所述该海洋细菌命名为NotoacmeibactermarinusIMDGXO 109，保藏号为CCTCC NO：M 2018148；保藏地点为：中国，武汉，武汉大学，中国典型培养物保藏中心，保藏时间为2018年03月22日。

进一步说明，所述该菌株在LA培养基或NA培养基上生长良好，菌落呈红色，株菌属于革兰氏阳性菌，大小为0.3～0.7×0.8～3.1μm，表面光滑，游动型短杆菌，无气丝，有鞭毛。

如上的高产灵菌红素海洋细菌的分离鉴定方法，由以下具体步骤得到：梯度稀释筛选、纯培养纯化、16S rDNA鉴定。

如上的一种高产灵菌红素海洋细菌的发酵产物，所述发酵产物为灵菌红素，具体通过以下方法制备得到：

(1)将从海洋生物中分离得到的细菌进行活化，待菌体生长到对数期时，于培养基中，于27～29℃、170～190r/min下振荡，发酵培养20～28h，得到发酵培养液；

(2)将发酵液离心后所得红色菌体，IMDGX0109菌株所产色素为胞内色素，采用质量分数为20％-30％的有机试剂丙酮浸泡过夜；

(3)将步骤(2)所得红色菌体用磁力搅拌器在室温下避光搅拌30min，离心至菌体无色，收集丙酮萃取液，接着使用旋转蒸发仪浓缩得到色素粗提物；

(4)将所得色素粗提物用按照体积比为1:3的三氯甲烷和去离子水混合萃取并浓缩得到纯化后的色素提取物，整个过程在避光状态下进行处理。

进一步说明，所述纯化后的色素提取物的产量达到0.632g/L以上，纯度达到98％以上。

进一步说明，所述改良Isp2培养基的配制方法为：首先称取葡萄糖2g/L、酵母提取物2g/L、麦芽提取粉2g/L溶于蒸馏水中，并在121℃下高压灭菌20min。

与现有技术相比较，本发明具有如下有益效果：

1、本发明提供的一株具备高产灵菌红素类化合物的海洋细菌IMDGX0109，该菌株是从海洋生物共附生微生物中分离筛选得到的，工艺简单，菌种对环境友好；