[发明专利]一种定向诱导提高养心菜植株耐盐性的方法

权利要求书

1.一种定向诱导提高养心菜植株耐盐性的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)选取健壮养心菜成年植株，将中间部位冲洗干净后，茎、叶分离，茎切5-8cm段备用，对茎段进行预消毒后，用灭菌后的蒸馏水冲洗干净，再用0.1％的升汞溶液灭菌10-15min，最后用灭菌后的蒸馏水冲洗干净，得到无菌的茎段；

(2)将步骤(1)中得到的无菌的茎段先切成1cm的茎段，再纵切，得到半圆柱形茎段，将半圆柱形茎段接种于诱导培养基中，12-15d后获得茎段愈伤组织；

(3)将步骤(2)的茎段愈伤组织接种到含有110mmol/L NaCl的继代培养基中，培养15-20d，然后选取淡黄色的愈伤组织移入含有130mmol/L的NaCl的MS培养基中，进行第二代盐基培养；15-20d后，选取淡黄色的愈伤组织移入170mmol/L NaCl的MS培养基中，进行第三代盐基培养；15-20d后，选淡黄色的愈伤组织移入190mmol/L的NaCl的MS培养基中，进行第四代盐基培养，培养15-20d，然后选择长势良好的组织移入210mmol/L的NaCl的MS培养基中，进行第五代盐基培养，培养15-20d后，获得耐盐愈伤组织；

(4)将步骤(3)的耐盐愈伤组织移入分化培养基中，继续培养15-20d后，选取生长健壮的小苗移入生根培养基中，10-15d完成生根，获得耐盐试管苗，继续培养28-32h，闭瓶炼苗10-15d，然后移植至体积比为2:1的草炭和蛭石形成的基质中，30d后移栽至大棚土壤中。

2.如权利要求1所述定向诱导提高养心菜植株耐盐性的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述预消毒是指：将茎段浸泡在体积浓度为65-75％的乙醇溶液中。

3.如权利要求1所述定向诱导提高养心菜植株耐盐性的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述用0.1％的升汞溶液灭菌的时间为14min。

4.如权利要求1所述定向诱导提高养心菜植株耐盐性的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述诱导培养基的组成为：MS+6-BA 0.5mg/L+2,4D 0.2mg/L+7g/L琼脂+30g/L蔗糖，pH为5.7-6.0。

5.如权利要求1所述定向诱导提高养心菜植株耐盐性的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述继代培养基的组成为：MS+6-BA 0.4mg/L+NAA 0.2mg/L+琼脂粉7g/L+蔗糖30g/L，pH为5.7-6.0。

6.如权利要求1所述定向诱导提高养心菜植株耐盐性的方法，其特征在于，步骤(4)中，所述分化培养基的组成为：MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.01mg/L+琼脂粉7g/L+蔗糖30g/L，pH为5.7-6.0。

7.如权利要求1所述定向诱导提高养心菜植株耐盐性的方法，其特征在于，步骤(2)、(3)、(4)的培养条件为：温度为21-23℃，每天光照时间为12-16h，光照设备为白炽灯管，光照强度2000lux。

8.如权利要求1至7任一项所述定向诱导提高养心菜植株耐盐性的方法，其特征在于，步骤(4)中，炼苗条件为温度为21-23℃、空气湿度80-85％。