[发明专利]用于甲胎蛋白异质体分离检测的组合物和试剂盒

权利要求书

1.一种用于甲胎蛋白异质体的分离、检测从而提高检测灵敏度和线性范围的组合物，其特征在于，包含两种以上的磁珠，其中至少一种磁珠为甲胎蛋白异质体分离磁珠，其用于分离甲胎蛋白异质体；至少一种磁珠为甲胎蛋白异质体检测磁珠，其用于检测甲胎蛋白异质体，且所述甲胎蛋白异质体检测磁珠的表面经选自由羧基、羟基和氨基组成的组中的至少一种生物活性基团处理，从而形成羧基磁珠、羟基磁珠或氨基磁珠，所述羧基磁珠、羟基磁珠或氨基磁珠能够与甲胎蛋白抗体结合，形成磁珠-抗体复合物；

其中所述甲胎蛋白异质体分离磁珠和所述甲胎蛋白异质体检测磁珠位于不同的溶液中，且所述甲胎蛋白异质体分离磁珠的粒径和/或平均粒径与所述甲胎蛋白异质体检测磁珠的粒径和/或平均粒径的比值为2:1-200:1，且所述甲胎蛋白异质体检测磁珠的粒径和/或平均粒径为0.01μm-100μm。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述甲胎蛋白异质体分离磁珠的粒径和/或平均粒径与所述甲胎蛋白异质体检测磁珠的粒径和/或平均粒径的比值为10:1-100:1。

3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述甲胎蛋白异质体分离磁珠的粒径和/或平均粒径与所述甲胎蛋白异质体检测磁珠的粒径和/或平均粒径的比值为10:1-50:1。

4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述甲胎蛋白异质体分离磁珠的粒径和/或平均粒径为1μm-1000μm。

5.根据权利要求1所述的组合物，其中所述甲胎蛋白异质体分离磁珠经高分子材料包埋处理形成复合包埋磁珠，且所述高分子材料选自由硅化物、聚苯乙烯、葡聚糖、琼脂糖、牛血清白蛋白和纤维素组成的组的中的至少一种。

6.根据权利要求5所述的组合物，其中所述复合包埋磁珠与凝集素偶联形成磁珠-凝集素偶联复合物，用于样本中甲胎蛋白异质体的分离；其中所述凝集素包括小扁豆凝集素和/或刀豆凝集素。

7.根据权利要求1所述的组合物，其还包括选自分离洗脱液、分离清洗液、检测清洗液、酶标记抗体和底物液组成的组中的至少一种。

8.根据权利要求1-7任一项所述的组合物在制备用于提高甲胎蛋白异质体的分离效率和精准度的试剂盒中的用途，其特征在于，所述试剂盒设计为包括甲胎蛋白异质体分离组合物、甲胎蛋白异质体检测组合物的形式，其中甲胎蛋白异质体分离组合物包含甲胎蛋白异质体分离磁珠，甲胎蛋白异质体检测组合物包含甲胎蛋白异质体检测磁珠；所述试剂盒用于通过甲胎蛋白异质体的分离和检测两个步骤获得样本中的甲胎蛋白异质体的定量检测结果。

9.根据权利要求1-7任一项所述的组合物在制备用于提高甲胎蛋白异质体的分离效率和精准度的试剂盒中的用途，其特征在于，所述试剂盒设计为包括甲胎蛋白异质体分离组合物、甲胎蛋白异质体检测组合物和甲胎蛋白检测组合物的形式，其中甲胎蛋白异质体分离组合物包含甲胎蛋白异质体分离磁珠，甲胎蛋白异质体检测组合物包含甲胎蛋白异质体检测磁珠，甲胎蛋白检测组合物包含与甲胎蛋白异质体检测磁珠相同的检测磁珠；所述试剂盒用于同时获得样本中的甲胎蛋白异质体的定量检测结果、甲胎蛋白的定量检测结果、甲胎蛋白异质体比率共计三种检测结果；所述甲胎蛋白异质体比率＝甲胎蛋白异质体的定量检测结果/甲胎蛋白的定量检测结果。

10.根据权利要求8或9所述的用途，所述试剂盒包括第一试剂条和第二试剂条，且所述第一试剂条和第二试剂条设计为单人份检测形式；所述第一试剂条设计为包含甲胎蛋白异质体分离试剂、甲胎蛋白异质体检测试剂，所述第二试剂条设计为包含所述甲胎蛋白检测试剂。

11.根据权利要求8所述用途，其中所述试剂盒的甲胎蛋白和甲胎蛋白异质体的空白检测限为0.1ng/ml以下；在0.6-1200ng/mL范围内，甲胎蛋白和甲胎蛋白异质体的线性相关系数为0.99以上；在5％-100％范围内，甲胎蛋白异质体比率的线性相关系数为0.99以上。