[发明专利]一种量子点快诊试纸的制备及应用在审
申请号: | 201810691412.2 | 申请日: | 2018-06-28 |
公开(公告)号: | CN108982828A | 公开(公告)日: | 2018-12-11 |
发明(设计)人: | 王立坚;王弘婷;唐春 | 申请(专利权)人: | 长春万成生物电子工程有限公司 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53 |
代理公司: | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人: | 崔自京 |
地址: | 130000 吉林省长春市高新产业开发*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 量子点 试纸 制备 量取 吹打 离心管 淬灭 活化 偶联 标记抗体 标记溶液 上层清液 生物分子 离心机 封闭液 复溶液 甘氨酸 灵敏度 检测 荧光 放入 羧基 封闭 应用 | ||
1.一种量子点快诊试纸的制备,其特征在于,包括以下步骤:
1)量取PB缓冲液加至离心管中,另外加入30-50ul的EDC溶液和10-30ul的NHS溶液,吹打均匀;然后再量取量子点材料1-5ul,吹打均匀,进行活化;
2)所述步骤1)活化完成后,量取标记抗体1-5ul,加入步骤1)中的离心管,吹打均匀,反应时间为10-36h;
3)在所述步骤2)反应结束后,加入淬灭液甘氨酸溶液30-60ul,吹打均匀,淬灭30-60min;
4)在所述步骤3)反应结束后,再加入封闭液10-30ul,封闭20-40min;
5)所述步骤4)封闭结束后,将离心管放入离心机中离心;
6)将所述步骤5)中离心结束的离心管取出,弃去上层清液,另加入200-500ul的复溶液,吹打均匀,即得标记溶液,最后通过传统方法再进行制备快诊试纸。
2.根据权利要求1所述的一种量子点快诊试纸的制备,其特征在于,所述步骤1)中的量子点材料为水溶性CdSe/Cds/ZnS QDs羧基。
3.根据权利要求1所述的一种量子点快诊试纸的制备,其特征在于,所述步骤1)中的抗体为肌钙蛋白I抗体、α-HCG抗体、肌红蛋白抗体、肌酸激酶同工酶抗体、降钙素原抗体、人血清淀粉样蛋白A抗体、C反应蛋白抗体、叶酸抗体、维生素D抗体中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的一种量子点快诊试纸的制备,其特征在于,所述步骤1)中的PB溶液pH值为6.8-8.0。
5.根据权利要求1-4任一项所述的一种量子点快诊试纸的制备,其特征在于,所述步骤4)中的封闭液为质量分数1-10%的BSA。
6.根据权利要求5所述的一种量子点快诊试纸的制备,其特征在于,所述步骤5)中的离心参数为:离心转数为10000-20000r/min,离心温度为2-8℃,时间为40-80min。
7.根据权利要求5所述的一种量子点快诊试纸的制备,其特征在于,所述步骤1)中加入的PB缓冲液浓度为0.05-0.3M,用量为30-60ul。
8.根据权利要求5所述的一种量子点快诊试纸的制备,其特征在于,所述步骤1)中活化时间为10-60min,活化温度为35-40℃。
9.根据权利要求1任一项所述的一种量子点快诊试纸的制备,其特征在于,所述步骤6)中的复溶液为0.1-0.3M的PB缓冲液,其中包含甘氨酸0.1-1.0%,牛血清白蛋白0.1-1.0%,柠檬酸三钠0.1-1.0%,聚乙烯吡咯烷酮K300.01-0.1%,蔗糖2-10%,吐温200.1-0.5%,叠氮钠0.1-1.0%。
10.一种由权利要求1-9任一项所述的方法所制备的快诊试纸在检测肌钙蛋白、人绒毛膜促性腺激素、肌红蛋白、肌酸激酶同工酶、降钙素原、人血清淀粉样蛋白A、C反应蛋白、叶酸、维生素D中的应用。
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