[发明专利]一种从灵芝中提取灵芝多糖的方法

说明书

本发明提供提供一种从灵芝中提取灵芝多糖的方法，涉及生物制药技术领域，该提取方法包括脱脂、浸润、酶处理、超声波提取、二次提取和醇沉。该提取方法采用脱脂、破壁处理、酶处理和超声辅助法协同作用，具有操作步骤简单、节省溶剂、产物收率高、处理时间短等优点。

技术领域

本发明涉及生物制药技术领域，具体涉及一种一种从灵芝中提取灵芝多糖的方法。

背景技术

灵芝为多孔菌科真菌赤芝或紫芝的干燥子实体。灵芝是一种珍贵的药用真菌，属于担子菌纲多孔菌科灵芝属，在我国有两千多年的药用史。灵芝首载于《神农本草经》，历代医家都认为灵芝能治疗多种疾病，是滋补强壮扶正固本的珍贵药物。目前已从灵芝中分离得到：三萜类化合物、多糖类、核苷类、甾醇类、生物碱类、呋喃衍生物、氨基酸多肽类、无机元素和脂肪酸等多种成分。其中，灵芝多糖是灵芝所含的主要有效成分之一，因其具有抗肿瘤、免疫调节、抗氧化和抗衰老等作用而倍受人们关注。灵芝多糖存在于灵芝的子实体、孢子粉和菌丝体中，具有抑制肿瘤、增强机体对自由基清除的能力，故能减少自由基对机体的损伤、有延缓衰老之功效，还可以提高免疫力、抗炎症、降血脂、降血糖等作用。

热水浸提法是提取灵芝多糖常用的方法之一。但是，传统热水浸提法存在提取时间长、温度高、得率低的问题。为克服传统水提取法的不足，近年来，出现了超声或微博辅助萃取、超高压、酶法等新的提取技术与方法，但是这些方法的提取效果也很不理想。与其它食用菌不同，灵芝子实体木质化程度高，结构复杂，多糖一般木质素通过物理或化学键结合在一起，采用一般的方法很难将多糖提取出来。为克服以上方法的缺陷，申请号为201510764260.0的发明专利公开了一种从灵芝子实体中提取灵芝多糖的方法，利用亚氯酸钠-冰醋酸氧化体系来消解灵芝子实体中的木质素和纤维素，使灵芝多糖更多的释放出来，从而提高灵芝多糖的提取效率，但是提取率仍然不高，且用酸碱处理影响多糖的品质。

发明内容

本发明的发明目的是，针对上述问题，提供一种从灵芝中提取灵芝多糖的方法，该提取方法采用酶处理和超声辅助法协同作用，具有操作步骤简单、产物收率高、处理时间短等优点。

为达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：

一种从灵芝中提取灵芝多糖的方法，包括以下步骤，

S1、脱脂：对灵芝子实体进行干燥、粗碎；加入5～10倍重量的乙醇，在75～80℃条件下回流提取进行脱脂，得到粗提物。

S2、浸润：将所述粗提物进行干燥、破壁，然后加入5～10倍重量的水，在50～70℃下浸泡1～3h，得到预处理液。

S3、酶处理：调节所述预处理液的pH为6～8，然后加入灵芝子实体质量的3～8％的复合酶，在40～55℃下处理1～3h，然后灭酶，得到提取液。

所述复合酶包括质量比为2～5:1～3:2:1～3:2:2:1的纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、木聚糖酶、ɑ-淀粉酶、中性蛋白酶和甘露聚糖酶。

S4、超声波提取：将所述提取液超声波提取30～40min，提取温度为40～45℃，然后离心过滤得上清液I和残渣。

S5、二次提取：将步骤S4中的残渣进行二次提取，向所述残渣加入5～8倍体积的水，在超高压200～300Mpa、75～85℃条件下处理20～40min，然后离心过滤得上清液II。；

S6、醇沉：合并上清液I和上清液II得滤液，将所述滤液减压浓缩至原质量的40～60％，加入95％乙醇，使滤液中乙醇终浓度为75～85％，静置2～4h过滤、真空干燥、粉碎，得灵芝多糖。

优选的，步骤S1中，灵芝子实体粗碎为40～50目。

优选的，步骤S1中，所述乙醇的体积分数为80～90％。

优选的，步骤S2中，将所述粗提物进行干燥、破壁为400～600目。