[发明专利]一种金水宝片的指纹图谱检测方法

权利要求书

1.一种金水宝片指纹图谱的检测方法，其特征在于，包括以下步骤

步骤1，供试品溶液的制备：取金水宝片加入甲醇，超声处理，加甲醇定容滤过，取续滤液至蒸发皿中，蒸发溶剂至干，残渣用水溶解，定容，滤过，续滤液为供试品溶液；

步骤2，将供试品溶液，注入高效液相色谱仪，测定，记录色谱图；

步骤3，将色谱图和标准指纹图谱对照，两者符合，为合格品；

其中，色谱条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(柱长为25cm，内径为4.6mm，粒径为5μm)；以甲醇为流动相A，以0.02mol/L的磷酸二氢钾溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为260nm。理论板数按腺苷峰计算应不低于5000，其中梯度洗脱流程如下：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，供试品溶液的制备取金水宝片20片，除去包衣，精密称定，研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率500W，频率40kHz)20分钟，取出，放冷，再称定重量，加70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液25ml至蒸发皿中，回收溶剂至干，残渣用水溶解，定容至25ml容量瓶中，滤过，得续滤液；

步骤2，精密吸取上步所得续滤液l0μl，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，

步骤3，将色谱图和标准指纹图谱对照，供试品指纹图谱中应分别呈现与参照物色谱峰保留时间相同的色谱峰。按中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算，供试品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度不得低于0.90。

3.一种指纹图谱的建立方法，所述方法步骤如下：

步骤1，参照物溶液的制备取尿苷、鸟苷及腺苷对照品适量，精密称定，加水制成每1ml分别各含25μg的混合溶液，即得。

步骤2，供试品溶液的制备取多批次合格的金水宝片样品20片，除去包衣，精密称定，研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率500W，频率40kHz)20分钟，取出，放冷，再称定重量，加70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液25ml至蒸发皿中，回收溶剂至干，残渣用水溶解，定容至25ml容量瓶中，滤过，取续滤液，即得。

步骤3，分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各l0μl，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图；所得多批次合格样品的色谱图经过计算机模拟软件综合，得到标准的合格样品的高效液相色谱图，即指纹图谱；

其中，色谱条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(柱长为25cm，内径为4.6mm，粒径为5μm)；以甲醇为流动相A，以0.02mol/L的磷酸二氢钾溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为260nm。理论板数按腺苷峰计算应不低于5000，其中梯度洗脱流程如下：