[发明专利]异养硝化-好氧反硝化的副球菌菌株、种子液及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种异养硝化‑好氧反硝化的副球菌菌株，所述菌株为副球菌LJ2(Paracoccus versutus LJ2)，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏时间为2018年3月21日，保藏编号为GDMCC NO：60338。本发明的副球菌LJ2，具有极高的耐受高浓度有机物的能力，在高有机负荷条件下也具有极佳的脱氨氮、硝酸盐氮及亚硝酸盐氮的能力；并且在极宽C/N比范围内仍具有稳定的脱氨氮、硝酸盐氮及亚硝酸盐氮的能力。因而副球菌LJ2可为高浓度有机物含氮废水生物脱氮处理提供种菌资源，具有巨大的应用价值。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及一种异养硝化-好氧反硝化的副球菌菌株、种子液及其制备方法和应用。

背景技术

随着社会的不断发展，人们的生活水平也在不断提高，为了满足人们的需求，养殖业也在不断的壮大，但养殖业的快速发展和高密度的养殖模式，导致严重的环境污染。养殖废水是具有典型的“三高特征”，CODcr高达几千至几万mg·L^-1，NH₄⁺-N高达800～2200mg·L^-1，SS超标数十倍，是高氮、高有机物负荷污染废水。未经处理的养殖废水中富含大量无机氮，包括：硝酸盐、亚硝酸盐及铵盐3种物质，是排入水体中的主要污染源之一。

生物脱氮是在不同种类的微生物作用下，将有机氮和无机氮转化为氮气的过程。生物脱氮工艺具有成本低、操作简单、无二次污染和处理效果好等特点，广泛应用于养殖废水处理上。传统的生物脱氮工艺即自养硝化-厌氧反硝化工艺，一般过程包括氨化，硝化和反硝化3 个过程，存在基建费用高、水力停留时间长、能耗大、抗冲击能力弱等不足。

异养硝化-好氧反硝化菌能利用有机碳作为碳源进行硝化作用，并且能在有氧条件下进行反硝化作用，现已广泛应用于废水处理的新型脱氮工艺过程中。近年来，越来越多的异养硝化-好氧反硝化菌被发现，主要包括泛养硫球菌(Thiosphaera pantoropha)、副球菌 (Pseudomonas)、不动杆菌(Acinetobacter)等。这些细菌因具有生长快、活性高、增殖底物广泛、能同时进行异养硝化和好氧反硝化等优势，具有显著的工程应用价值。

目前，异养硝化菌在养殖废水中的实际脱氮能力达不到理论值，这可能是由于实际养殖废水的成分更加复杂，如废水有机物过高，抑制了异氧硝化菌中的酶活性，甚至导致菌株死亡，致使其脱氮能力下降。因此，筛选出具有良好脱氮性能且能适应高浓度有机物废水环境的异养硝化-好氧反硝化菌成为研究热点。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种能适应高浓度有机物废水环境的异养硝化-好氧反硝化副球菌。

为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：

一种异养硝化-好氧反硝化的副球菌菌株，所述菌株为副球菌LJ2(Paracoccusversutus LJ2)，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏时间为2018年3月21日，保藏编号为GDMCC NO：60338。

作为一个总的发明构思，本发明还提供一种副球菌种子液，所述副球菌种子液由上述的副球菌菌株经活化培养后制备得到。

作为一个总的发明构思，本发明还提供一种如上述的副球菌种子液的制备方法，包括以下步骤：

将副球菌菌株LJ2接种到LB培养基中培养至对数期，所得菌悬液离心去除上清液，洗涤后加无菌水，得到副球菌种子液。

在其中一个实施例中，所述培养的过程为：在温度为25～35℃、转速为100～180rpm下振荡培养36～60h。

在其中一个实施例中，所述LB培养基的成分为：胰蛋白胨10g·L^-1，酵母浸膏5g·L^-1， NaCl 10g·L^-1，pH 7.0。