[发明专利]老鹳草提取物及其医药用途

说明书

本发明提供老鹳草提取物及其医药用途，具体地，本发明提供从老鹳草中提取纯化得到的四个分级组分以及两个活性单体，其显示出较好的抗TNFα活性以及较低的毒性，可用于炎症尤其是关节炎的治疗。

技术领域

本发明涉及中药领域，具体地，本发明涉及老鹳草提取物及其在制备抑制TNFα的药物以及抗炎药物中的用途。

背景技术

老鹳草(Geranium wilfordii)是牻牛儿苗科老鹳草属植物，别名：老鹳草《纲目拾遗》、五叶草《滇南本草》、老官草《滇南本草》、五瓣花《滇南本草图谱》、老贯草《滇南本草图谱》、天罡草《分类草药性》。老鹳草的主要化学成分包括鞣质、黄酮类、有机酸及挥发油等。迄今，已知老鹳草的药理作用包括抗菌、抗病毒、抗氧化、抗肝病、止血及抗肿瘤等功效。

肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor alpha，TNFα)是一种多功能单核细胞素，其是由巨噬细胞、单核细胞及天然杀手细胞所释出并在急性和慢性发炎疾病、抗肿瘤反应及感染中扮演着关键角色。TNFα促进炎症反应，与许多与自身免疫性疾病相关的临床问题的发展有关，例如类风湿性关节炎，强直性脊柱炎，炎性肠病，牛皮癣，银屑病关节炎，化脓性支原体炎和难治性哮喘等。而临床研究业已证实TNFα在类风湿性关节炎的发病机制上扮演着重要角色。

这些都提示了一个抗炎的途径：抑制TNFα的活性以控制炎症的发展，该途径对患者的生活质量有着很好的改善作用。目前已使用TNFα拮抗剂治疗与炎症相关疾病。然而，TNFα拮抗剂抗炎方法存在毒性大、抗药性或效果较低的缺点。

在今天“回归自然”思潮的影响下，天然药物的开发成为一股强大的潮流，而中药又以其丰富的资源、独特的疗效、较小的毒副作用引起世界的关注。因此，本领域仍需开发具有较小毒副作用、抗药性和/或高效的具有抗炎作用的中药。

发明内容

在一个方面，本申请提供老鹳草提取物A，其通过以下方法制备：

(1)将老鹳草在乙醇或乙醇水溶液中提取1-5次(例如1、2、3、4或5次)，收集提取液并浓缩，得老鹤草总提取物；

(2)将所述老鹤草总提取物用乙酸乙酯萃取1-5次(例如1、2、3、4或5次)，收集乙酸乙酯相并浓缩，将所得浓缩物在吸附树脂上用水和甲醇混合溶液进行梯度洗脱，收集V_水：V_甲醇＝(50:50)-(30:70)时的洗脱液并浓缩，得所述老鹤草提取物A。

本申请中所用术语“梯度洗脱”是指一种通过不断改变流动相浓度配比，从而使得样品中性质差异较大的组分实现良好分离的洗脱方法。在洗脱过程中，可通过TLC等手段进行跟踪，以区分不同组分组成和/或流动相配比下的洗脱液。

在某些优选的实施方案中，所述方法具有下述至少一项特征：

1)在步骤(1)中，将每Kg老鹳草在5-12L乙醇或乙醇水溶液中进行提取；

2)在步骤(1)中，将老鹳草在30-85wt％乙醇水溶液中提取；

3)在步骤(1)中，将老鹳草在室温进行提取；

4)在步骤(2)中，将所述浓缩物在大孔吸附树脂上梯度洗脱；

5)在步骤(2)中，将所得浓缩物用V_水：V_甲醇＝(95:5)-(30:70)的混合溶液进行梯度洗脱。

在某些优选的实施方案中，在步骤(1)中，将老鹳草在30-70wt％乙醇水溶液中提取；例如在30wt％，40wt％，50wt％，60wt％或70wt％的乙醇水溶液中提取。

在某些优选的实施方案中，在步骤(2)中，将所述浓缩物在D101型大孔吸附树脂上进行梯度洗脱。