[发明专利]大鼠基因在制备筛选药物的试剂中的应用

说明书

本发明公开了大鼠基因在制备筛选药物的试剂中的应用，所述基因包括36个靶基因和/或昼夜节律通路相关基因和/或5‑羟色胺能神经突触通路相关基因，所述药物为抗抑郁药物，所述的试剂用于检测大鼠与抑郁障碍相关基因的表达。

技术领域

本发明涉及动物基因工程技术领域，涉及柴胡低极性成分在大鼠CUMS抑郁模型中的应用。

背景技术

抑郁症又称抑郁障碍，是由多种因素共同参与引起的，以长久的情绪低落为主要临床特征的心境障碍。随着社会的迅速发展，人们日常面对的压力逐步增加，抑郁症发病率逐年上升。据世界卫生组织最新统计，全球患心境障碍人口比例达12.8% ，并预计到2020年，抑郁症将成为第二大疾病负担源。近年来，国内外许多学者致力于研究这一疾病，因其发病机制复杂，西药治疗副反应较大等特点，越来越多的研究转向中医药领域。总结现有的数据发现，具有疏肝解郁的中药柴胡及其复方制剂约占中药抗抑郁用药的1/3，如逍遥散、柴胡舒肝散、小柴胡汤等广泛应用于临床，并且取得了良好的效果，显示了柴胡抗抑郁的重要性。

柴胡原名茈胡，始载于《神农本草经》，列为上品，在我国已有2000多年的用药历史。《中国药典》2010版收载柴胡（又名：北柴胡，Bupleurum chinense DC.）和狭叶柴胡（B. scorzonerifolium Willd.）的干燥根为中药柴胡（Bupleuri Radix）的植物来源。《神农本草经》记载：“柴胡主寒热，寒热者少阳外感之邪也。又谓其主心腹肠胃中结气，饮食积聚，诚以五行之理，木能疏土，为柴胡善达少阳之木气，则少阳之气自能疏通胃土之郁，而其结气饮食积聚自消化也。”这不仅是柴胡的基本功效，也是柴胡“疏肝解郁”的理论基础。以柴胡为君药的柴胡类方剂在郁证治疗中效果显著，这与柴胡的药理作用密切相关。郭晓擎等通过行为学和代谢组学研究发现，由北柴胡和南柴胡组成的逍遥散都具有显著的抗抑郁作用。动物实验结果显示，柴胡能够显著降低抑郁模型大鼠脑组织中前额叶5-羟色胺（5-HT）和多巴胺（DA）的含量，上调海马区脑源性神经营养因子（BDNF）的表达。柴胡抗抑郁作用的有效成分也是近年来研究的重点。柴胡的主要成分是柴胡皂苷，研究表明柴胡皂苷具有抗抑郁作用。柴胡皂苷能通过抑制大脑海马区胆碱乙酰转移酶蛋白的表达来影响神经递质乙酰胆碱（ACH）的代谢，减少神经细胞凋亡而起到抗抑郁作用。另有实验证实，适当剂量的柴胡皂苷可有效增加抑郁大鼠海马BDNF的表达而产生抗抑郁作用。

以DNA为模板合成mRNA的过程为转录，特定的细胞、组织或器官在生理或病理状态下，在特定时间所能转录的所有核糖核酸（RNA）的总和称为转录组。转录组学是在整体水平上研究特定时空某一细胞、组织或器官中基因全部转录本的种类、结构和功能及转录调控规律的学科。通过转录组学的研究，不仅可以了解细胞、组织或器官基因组的功能元件，揭示其分子成分，还可以认识、预测生物学进程和疾病发生的机制。国内，曾坤建立了抑郁症的社会挫败动物模型，对小鼠的海马组织总RNA进行RNA-seq测序，对所得数据进行差异表达基因分析、GO功能分类分析和相关通路分析，筛选出EGFc，Pik3r5，Pik3r6，Gprl03、133、179和GABAAγ3基因进行了细致分析，并探讨它们与抑郁之间的联系，为进一步的研究提供转录水平的分子资源。王瑜博士采用慢性束缚应激(CRS)建立大鼠模型，从行为学及大鼠脑组织不同部位（海马、额叶和垂体）转录组学水平对抑郁症及针刺抗抑郁作用机制进行了探讨。Mahajan GJ等对临床23例严重抑郁障碍（MDD）患者和23例精神正常对照者的海马齿状回组织穿孔样本进行收集，采用RNA-seq测序分析技术，结果显示MDD患者海马齿状回组织的与神经炎症发生有关的ERK/MAPK信号通路过度表达，表明神经炎症在MDD中起着至关重要的作用。转录组学技术的出现及迅速发展，为抑郁症提供了全新的研究手段并展现了良好的研究效果。慢性轻度不可预见性应激抑郁（CUMS）模型作为一种有效的抑郁模型，已被广泛应用于抑郁障碍的基础研究和药物筛选。

发明内容