[发明专利]一种外周血染色体专用真空采集管及染色体制备方法

权利要求书

1.一种外周血染色体专用真空采集管，包括管体（1）和套于管体（1）上部的管帽（2），其特征在于：所述管体（1）底部呈圆锥状，所述管帽（2）顶面设第一穿刺孔（3）和第二穿刺孔（4），管帽（2）内、管体（1）上方设橡胶隔层（7），橡胶隔层（7）与管帽（2）内顶面之间的空腔为负压腔（8）。

2.根据权利要求1所述的一种外周血染色体专用真空采集管，其特征在于：所述管帽（2）一侧开设通孔Ⅰ（5），管体（1）上与管帽通孔Ⅰ（5）对应处开设通孔Ⅱ（9），当通孔Ⅰ（5）与通孔Ⅱ（9）处于同一方向时，管体（1）内腔与大气连通。

3.根据权利要求2所述的一种外周血染色体专用真空采集管，其特征在于：所述管帽（2）与管体（1）之间为螺纹连接。

4.根据权利要求3所述的一种外周血染色体专用真空采集管，其特征在于：所述管体（1）容量为15毫升，管体壁上设刻度（6）。

5.一种染色体制备方法，其特征在于：它是使用权利要求4所述的一种外周血染色体专用真空采集管来实现标本采集和培养同管的人类外周血染色体制备方法，具体步骤如下：

一、制备标本采集专用管

（1）取权利要求4所述的一种外周血染色体专用真空采集管1支；

（2）将通孔Ⅰ与通孔Ⅱ扭至同一方向，通过通孔Ⅰ和通孔Ⅱ加入培养液，作为标本采集专用管；

二、标本的采集和培养

（3）采集外周血，通过穿破第一穿刺孔和橡胶隔层加入步骤（2）所准备的专用管管体中，轻摇混匀；

（4）将管放入恒温培养箱中进行培养；

（5）培养终止前通过第二穿刺孔向管中加入秋水仙素，混匀；

（6）继续放入恒温培养箱中进行培养，得到血液和培养液的混合物；

三、收获细胞

（7）将步骤（6）得到的混合物从培养箱中取出，轻摇混匀，离心，弃去上清；

（8）低渗：向管中加入KCL溶液，混匀后进行水浴；

（9）细胞预固定：向管中加入固定液，轻摇混匀，静置后进行离心；

（10）细胞固定：将管取出，弃去上清，加入固定液，静置后进行离心，重复本步骤三次；

四、制片

（11）将管取出，弃去上清，加入适量固定液，混匀成细胞悬液；

（12）将细胞悬液滴于玻片中央；

（13）对玻片进行烘烤，G显带，用于染色体核型分析的染色体标本制备完成。

6.根据权利要求5所述的染色体制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中，加入的培养液为5ml，得到的标本采集专用管在不立即使用时，放入－20℃环境下进行保存备用，使用前复溶至室温，再行采集标本。

7.根据权利要求6所述的染色体制备方法，其特征在于：所述步骤（4）中，将管斜立于37℃恒温培养箱中培养66-72小时，所述步骤（6）中，继续放入37ºC恒温培养箱中培养0.5～1.5小时。

8.根据权利要求7所述的染色体制备方法，其特征在于：所述步骤（7）中，在轻摇混匀后，1800r/min离心6～10分钟，所述步骤（8）中，向管中加入5ml已预温至37ºC的0.075mol/LKCL溶液，混匀后，37ºC水浴25～35分钟，所述步骤（9）中，向管中加入0.5ml新鲜固定液，轻摇混匀，静置4～6分钟，1800r/min离心6～10分钟，所述步骤（10）中，加入5ml新鲜固定液，静置5～10分钟，1800r/min离心6～10分钟。

9.根据权利要求8所述的染色体制备方法，其特征在于：所述步骤（13）中，将玻片置于75～80ºC环境下烘烤2.5～3.5小时。