[发明专利]一种病毒液的浓缩方法有效
| 申请号： | 201810708329.1 | 申请日： | 2018-07-02 |
| 公开（公告）号： | CN108795886B | 公开（公告）日： | 2022-01-11 |
| 发明（设计）人： | 吴娟;缪汝娉;鲍大为 | 申请（专利权）人： | 苏州良辰生物医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/02 | 分类号： | C12N7/02 |
| 代理公司： | 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 | 代理人： | 汪青;周敏 |
| 地址： | 215613 江苏省苏州市张家*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 毒液 浓缩 方法 | ||
1.一种病毒液的浓缩方法，其特征在于：将生物膜放置于器皿中，然后按照1g所述的生物膜的重量加入18~25ml病毒液的量向所述的器皿中加入所述的病毒液，在2~8℃下吸附1~3h后进行冷冻干燥，然后用含1~3wt%胎牛血清的培养基复溶，将所述的生物膜剪碎后匀浆，然后经离心去除生物膜碎片，上清液经过滤得到浓缩后的病毒液；
所述的病毒液为猪细小病毒液或呼肠孤病毒液；
所述的生物膜为脱细胞后的生物膜；
所述的病毒液为将病毒接种于细胞，进行细胞培养至90%~100%细胞出现病变，然后经反复冻融使宿主细胞破碎，离心去除细胞碎片，收集上清液即为所述的病毒液；
控制所述的离心的温度为3~5℃，转速为2500~3500rpm，离心时间为8~12min。
2.根据权利要求1所述的病毒液的浓缩方法，其特征在于：所述的病毒液的具体制备方法为：将病毒主代毒种，用不含胎牛血清的培养基稀释8~12倍，然后接种于细胞中，吸附0.5~1.5h使病毒悬液与细胞充分接触，加入含1~3wt%胎牛血清的培养基，进行所述的细胞培养至90%~100%细胞出现病变，然后经反复冻融使宿主细胞破碎，离心去除细胞碎片，收集上清液即为所述的病毒液。
3.根据权利要求1或2所述的病毒液的浓缩方法，其特征在于：用于接种所述的病毒的细胞为生长成片的细胞。
4.根据权利要求1所述的病毒液的浓缩方法，其特征在于：所述的生物膜平铺于所述的器皿中。
5.根据权利要求1所述的病毒液的浓缩方法，其特征在于：向所述的器皿中加入所述的病毒液后，对所述的器皿进行称重记为W1；向所述的器皿中加入含1~3wt%胎牛血清的培养基复溶后，对所述的器皿进行称重记为W2；控制所述的W2为所述的W1的0.3~0.5倍。
6.根据权利要求1所述的病毒液的浓缩方法，其特征在于：采用0.22μm一次性滤器进行所述的过滤。
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