[发明专利]一种弹性蛋白酶及其提取方法

权利要求书

1.一种弹性蛋白酶的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：

提取步骤：将猪胰脏肉浆与其质量1~10倍浓度为0.1~0.5M、pH为4.0~7.0的第一磷酸盐缓冲液混合，使所述猪胰脏肉浆与所述第一磷酸盐缓冲液充分反应后，进行固液分离得初级提取液；

脱盐步骤：将所述初级提取液过3000~20000Da的分子量超滤膜浓缩脱盐得到电导小于5ms的次级提取液；

树脂平衡步骤：用浓度为0.02~0.1M、pH为4.5~6.5的第二磷酸盐缓冲液平衡装有CMBestarose FF的层析柱；

上样液制备步骤：调节所述次级提取液的pH至与所述第二磷酸盐缓冲液的pH相同后过滤得到上样液；

上样步骤：将所述上样液以2~4ml/min的速度过柱；

洗涤步骤：上样完毕后用第二磷酸盐缓冲液洗涤1~5个柱体积；

洗脱步骤：用浓度0.5~1.2M、pH为4.5~6.5的第三磷酸盐缓冲液洗脱2~8个柱体积，收集洗脱液；

脱盐步骤：用3000~20000Da分子量超滤膜浓缩脱盐至电导小于500us得弹性蛋白酶液。

2.根据权利要求1所述的弹性蛋白酶的提取方法，其特征在于，还包括干燥步骤：将所述弹性蛋白酶液干燥得到弹性蛋白酶粉。

3.根据权利要求2所述的弹性蛋白酶的提取方法，其特征在于，干燥方式为冷冻干燥。

4.根据权利要求2所述的弹性蛋白酶的提取方法，其特征在于，干燥之前还包括除菌步骤。

5.根据权利要求4所述的弹性蛋白酶的提取方法，其特征在于，所述除菌步骤是将所述弹性蛋白酶液过0.1~0.22μm的滤膜。

6.根据权利要求1所述的弹性蛋白酶的提取方法，其特征在于，采用过滤的方式进行固液分离。

7.根据权利要求1所述的弹性蛋白酶的提取方法，其特征在于，使所述猪胰脏肉浆与所述第一磷酸盐缓冲液充分反应是搅拌两者的混合液4~16小时。

8.根据权利要求7所述的弹性蛋白酶的提取方法，其特征在于，搅拌过程控制混合液温度为10~15℃，pH为5.5~6.0。

9.根据权利要求1所述的弹性蛋白酶的提取方法，其特征在于，将所述猪胰脏肉浆与所述第一磷酸盐缓冲液混合之前还包括将猪胰脏粉碎得到所述猪胰脏肉浆。

10.一种弹性蛋白酶，其特征在于，采用如权利要求1-9任一项所述的弹性蛋白酶的提取方法提取得到。