[发明专利]一种猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化方法

权利要求书

1.一种猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化方法，用于从重组酵母细胞裂解液中分离纯化猪圆环病毒2型病毒样颗粒，其特征在于，包括如下步骤：

步骤S1，收集表达猪圆环病毒2型病毒样颗粒的重组酵母细胞并进行破碎，获得含猪圆环病毒2型病毒样颗粒的细胞裂解液；

步骤S2，对所述细胞裂解液进行高速离心澄清，获得病毒样颗粒初提液；

步骤S3，对所述病毒样颗粒初提液进行离子交换层析，获得病毒样颗粒粗纯液；

步骤S4，对所述病毒样颗粒粗纯液进行超滤浓缩3~5倍，获得病毒样颗粒浓缩液；

步骤S5，对所述病毒样颗粒浓缩液进行凝胶过滤层析纯化，获得纯化后的病毒样颗粒，

其中，步骤S3中，所述离子交换层析的介质采用强阳离子交换介质，该强阳离子交换介质为Capto SP ImpRes，吸附过程所采用的缓冲液为50～150mM NaCl、0.01％Tween 80 的50mM磷酸盐缓冲液，pH为6.8，洗脱过程中所采用的缓冲液为1M NaCl、0.01％Tween 80的50mM磷酸盐缓冲液，pH为6.8，

步骤S4中，所述超滤浓缩采用截留分子量为30kDa的超滤管离心浓缩。

2.根据权利要求1所述的猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化方法，其特征在于：

其中，步骤S1中，所述破碎采用机械碾磨破碎、超声波破碎或高压均质破碎中的任意一种或多种联用。

3.根据权利要求1所述的猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化方法，其特征在于：

其中，所述高速离心的条件为10000g离心 30min。

4.根据权利要求1所述的猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化方法，其特征在于：

其中，步骤S5中，所述凝胶过滤层析的介质采用Sephacryl S-500 HR 或Sephacryl S-300 HR。