[发明专利]一种金黄色葡萄球菌噬菌体及应用

说明书

本发明公开了一种金黄色葡萄球菌噬菌体及应用，本发明噬菌体能够特异有效地消灭金黄色葡萄球菌，对耐药性金黄色葡萄球菌具有良好的体内、外抗菌作用，为临床开发预防治疗耐药性金黄色葡萄球菌感染的制剂提供实验基础，具有极大的临床应用潜力。在皮肤脓肿模型中，MOI＝10时，噬菌体治疗组裸鼠皮肤脓肿平均面积为47.32mm²、平均细菌裁量为3.553×10⁷CFU/g；MRSA感染组裸鼠皮肤脓肿平均面积为150.4mm²、平均细菌载量为2.284×10⁸CFU/g。噬菌体治疗组小鼠的皮肤脓肿面积、菌落计数都小于MRSA感染组，且差异具有统计学意义。

(一)技术领域

本发明涉及一种金黄色葡萄球菌噬菌体及应用。

(二)背景技术

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SAU)是临床上常见的致病性比较强的革兰阳性球 菌。自青霉素问世后，金黄色葡萄球菌引起的感染得到了控制，但随着青霉素的广泛使用，不断 产生新的耐药菌。1959年甲氧西林应用于临床治疗，曾有效地控制了耐青霉素金黄色葡萄球菌的 感染，然而1961年英国就分离到第一株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA)，目前其已成为院内和社区感染的重要病原菌之一。近几年，在我 国常见的医院获得性金葡菌的主要克隆型为ST239。而社区获得性的金葡菌主要克隆型为ST398 和ST59。

MRSA可以引起皮肤、软组织感染以及肺部感染。其引起的骨髓炎也是临床难以治疗的疾病。 此外，MRSA引起的菌血症和感染性心内膜炎可能会导致心力衰竭和死亡。

近年来，MRSA导致的感染逐年增多，其对抗菌药物的耐药性亦逐年上升，多重耐药菌的比 例明显增加。一直以来，万古霉素都是临床治疗MRSA感染的首选药物，曾被称为临床抗感染的 最后一道防线。但是随着万古霉素的广泛使用，万古霉素的敏感性正逐年降低，临床上逐渐产生 万古霉素中介金黄色葡萄球菌(Vancomycin-intermediateStaphylococcus aureus，VISA)和耐万古霉 素的金黄色葡萄球菌(Vancomycin-resistantStaphylococcus aureus，VRSA)。寻找新的治疗手段迫 在眉睫。

噬菌体(Bacteriophage)是一种能感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒的总称， 通过感染、增殖、成熟并释放子代等一系列的过程侵染病原体，达到裂解、杀灭宿主菌的作用。 早在1915年和1917年，Twort和D,Herelle就已各自独立发现了噬菌体的存在。之后的一段时间 里，许多科学家都针对噬菌体进行了各项研究并且应用于临床感染性疾病的治疗，也获得了一定 的疗效。然而，自20世纪40年代青霉素等抗生素的发现并应用以来，抗生素在很长一段时间里 都以其高效杀灭病原体，安全性高等特点获得了全世界范围内的广泛推广，这也使得大多数国家 终止了对噬菌体制剂的研究，导致对噬菌体治疗的研究被搁置下来。但是，由于抗生素的滥用， 出现了越来越多的耐药菌株，其耐药性也愈加广泛，甚至出现了泛耐药的“超级细菌”，新型抗生 素的研发速度远不及细菌出现耐药性突变的速度，于是，针对噬菌体治疗的研究又重新引起人们 的重视。

迄今为止，噬菌体应用于人体治疗的临床病例已有数千例；2006年美国食品和药品管理局首 次批准，将噬菌体用作食品添加剂，用于杀灭肉制品中的李氏杆菌。然而噬菌体的应用却始终未 得到推广，除上文述及的抗生素的发现与应用外，另一个原因是噬菌体对宿主菌特异性要求过高。 噬菌体能对抗的病原菌包括葡萄球菌、链球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金 黄色葡萄球菌等，能治疗的疾病包括化脓性伤口感染、皮炎、肺炎、脓胸、肠胃炎、脓毒症、骨 髓炎等。噬菌体治疗具有指数增殖、特异性强、易实时更新、副作用小、无残留及周期短、成本 低等优点，因而具有广阔的开发前景。

(三)发明内容