[发明专利]一种延胡索乙素分子印迹膜的制备方法及应用

说明书

本发明涉及一种延胡索乙素分子印迹膜的制备方法，从而获得一种用于纯化延胡索乙素及对延胡索乙素对映体具有拆分能力的分子印迹膜。所述方法包括：(1)聚偏氟乙烯微孔滤膜预处理；(2)预聚液制备；(3)印迹膜制备；(4)模板分子去除。本发明将分子印迹技术引入膜分离技术中，获得的分子印迹膜兼具两者的优点。对比常用的左旋延胡索乙素纯化及对映体拆分方法，分子印迹膜具有其他方法所不具备的强特异性和高选择性，并且便于连续操作、易于放大。

技术领域

本发明涉及对映体分离纯化技术领域，具体涉及一种延胡索乙素分子印迹膜的制备方法及应用。

背景技术

延胡索乙素是一种生物碱，由植物延胡索中分离得到。延胡索乙素具有较强的镇痛、镇静和催眠作用，用于胃溃疡及十二指肠溃疡的疼痛、月经痛、分娩后宫缩痛、紧张性失眠、痉挛性咳嗽等，均有镇痛功效，无成瘾性，毒性也较低，副作用小，安全度大；也可用于解除紧张和调整中枢神经系统机能。

延胡索乙素分子式C₂₁H₂₅NO₄，为薄片状结晶，在空气中易变黄，熔点148～149℃，不溶于水，溶于氯仿，能与各种无机酸生成结晶盐。其分子式如下，结构中具有一个手性中心，为光学消旋体，具有一对光学异构体。

该成分的有效部分是左旋体，即左旋延胡索乙素，其与阻滞中枢多巴胺受体有关。研究表明，延胡索乙素对映体在大鼠体内的药代动力学过程具有显著的立体选择性，而且对抑制人肝微粒体细胞色素P450酶的作用机理不同。因此，对其进行异构体拆分具有重要意义。

目前对延胡索乙素的研究主要是药材及制剂的含量测定，对延胡索乙素对映体拆分的报道较少，采用的方法主要有HPLC、毛细管电色谱和胶束毛细管电色谱等。上述拆分方法批处理能力小，工业放大成本高，不适于大规模生产。

发明内容

本发明的目的在于提供一种延胡索乙素分子印迹膜的制备方法，从而获得一种用于纯化延胡索乙素及对延胡索乙素对映体具有拆分能力的分子印迹膜。分子印迹技术是设计、合成对目标分子具有特异选择性和亲和力的人工聚合物技术，所得聚合物对模版分子具有特异的识别选择性与优良的结合亲和性。膜分离技术具有便于连续操作、易于放大、能耗低、能量利用率高等优点，但缺乏预定选择性，难以实现单个物质的选择性分离。

本发明将分子印迹技术引入膜分离技术中，获得的分子印迹膜兼具两者的优点。对比常用的左旋延胡索乙素纯化及对映体拆分方法，分子印迹膜具有其他方法所不具备的强特异性和高选择性，并且便于连续操作、易于放大。本发明还提供了所述延胡索乙素分子印迹膜的应用。

为实现上述目的，本发明的一个方面提供了一种延胡索乙素分子印迹膜的制备方法，所述制备方法包括下列步骤：

(1)聚偏氟乙烯微孔滤膜预处理：将聚偏氟乙烯微孔滤膜放于0.1mol/L二苯甲酮的氯仿溶液中充分浸泡，然后取出后真空干燥备用；

(2)预聚液制备：将左旋延胡索乙素和甲基丙烯酸溶解于氯仿中，超声振荡，室温下放置，使之充分形成模板-单体复合物，然后加入乙二醇二甲基丙烯酸酯和二苯甲酮，超声振荡，得预聚液；

(3)印迹膜制备：将处理过的聚偏氟乙烯微孔滤膜放入预聚液中浸泡30min，取出将其置于两玻璃片之间，除去其中的气泡，然后在紫外灯下照射，将玻璃片分开得到以聚偏氟乙烯微孔滤膜为载体的左旋延胡索乙素分子复合膜；

(4)模板分子去除：先以甲醇和冰醋酸的混合溶液洗脱复合膜上的模板分子，直至洗脱液在280nm紫外下无模板分子吸收，再用甲醇洗去残留的冰醋酸，真空干燥，即得到对左旋延胡索乙素具有选择性吸附作用的分子印迹膜。

进一步的，步骤(1)中聚偏氟乙烯微孔滤膜的孔径为0.42-0.48μm，优选0.45μm。