[发明专利]CLC基因的特异性引物在制备用于检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉亚型的试剂盒的应用有效

专利信息
申请号: 201810717444.5 申请日: 2018-07-03
公开(公告)号: CN108707661B 公开(公告)日: 2021-03-23
发明(设计)人: 张罗;王成硕;闫冰;刘畅 申请(专利权)人: 张罗;王成硕;闫冰;北京市耳鼻咽喉科研究所;首都医科大学附属北京同仁医院
主分类号: C12Q1/6883 分类号: C12Q1/6883;C12Q1/6851
代理公司: 北京智汇东方知识产权代理事务所(普通合伙) 11391 代理人: 康正德;陈智勇
地址: 100730 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: clc 基因 特异性 引物 制备 用于 检测 慢性 鼻窦炎 鼻息 肉亚型 试剂盒 应用
【权利要求书】:

1.一种CLC基因的特异性引物在制备用于检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉亚型的试剂盒的应用,其特征在于:所述试剂盒包括CLC基因的特异性引物。

2.根据权利要求1所述的CLC基因的特异性引物在制备用于检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉亚型的试剂盒的应用,其特征在于:所述CLC基因的上游引物如SEQ ID NO:2所示,所述CLC基因的下游引物如SEQ ID NO:3所示。

3.根据权利要求1所述的CLC基因的特异性引物在制备用于检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉亚型的试剂盒的应用,其特征在于:所述试剂盒进一步还包括内参基因的特异性引物。

4.根据权利要求3所述的CLC基因的特异性引物在制备用于检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉亚型的试剂盒的应用,其特征在于:所述内参基因为GAPDH,所述GAPDH的上游引物如SEQ IDNO:4所示,所述GAPDH的下游引物如SEQ ID NO:5所示。

5.根据权利要求3所述的CLC基因的特异性引物在制备用于检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉亚型的试剂盒的应用,其特征在于:所述试剂盒进一步还包括:从鼻息肉组织或从鼻黏膜脱落细胞中提取RNA的试剂;将总RNA逆转录为cDNA的试剂;采用定量聚合酶链反应将cDNA中的CLC基因和内参基因进行实时荧光定量PCR反应的试剂。

6.根据权利要求5所述的CLC基因的特异性引物在制备用于检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉亚型的试剂盒的应用,其特征在于:

所述将总RNA逆转录为cDNA的试剂包括:逆转录混合液和去RNA酶及去DNA酶的水;

采用定量聚合酶链反应将cDNA中的CLC基因和内参基因进行实时荧光定量PCR反应的试剂包括:PCR预混合液、双蒸水、机器荧光补偿及矫正剂、CLC基因的上游引物、CLC基因的下游引物、内参基因的上游引物和内参基因的下游引物。

7.根据权利要求5所述的CLC基因的特异性引物在制备用于检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉亚型的试剂盒,其特征在于:所述从鼻息肉组织或从鼻黏膜脱落细胞中提取RNA的试剂包括:RNA抽提液、氯仿、异丙醇、浓度为65%~90%的乙醇、去RNA酶及去DNA酶的水。

8.根据权利要求5所述的CLC基因的特异性引物在制备用于检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉亚型的试剂盒的应用,其特征在于:所述从鼻息肉组织中提取RNA的试剂包括:细胞裂解液、用于去除吸附有RNA的纯化柱的杂质的第一缓冲液、用于去除吸附有RNA的纯化柱的杂质和盐分的第二缓冲液和去RNA酶及去DNA酶的水;从鼻息肉组织中提取RNA的工具包括RNA纯化柱。

9.根据权利要求8所述的CLC基因的特异性引物在制备用于检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉亚型的试剂盒的应用,其特征在于:所述从鼻息肉组织中提取RNA的试剂还包括DNA酶反应液或所述从鼻息肉组织中提取RNA的工具还包括基因组DNA吸附柱;所述DNA酶反应液包括DNA酶缓冲液、重组DNA酶和去RNA酶的双蒸水。

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