[发明专利]集成式免疫层析试纸、其制备方法及应用

权利要求书

1.一种集成式免疫层析试纸，其特征在于，所述试纸基于固相化学发光体系，所述试纸包括底物垫和层析试纸；其中所述底物包括固态过氧化物，优选地，所述固态过氧化物为过硼酸钠。

2.根据权利要求1所述的试纸，其特征在于，所述底物还包括鲁米诺和对碘苯酚。

3.根据权利要求1或2所述的试纸的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)制备底物垫：配制底物混合物，用冷冻干燥方法将底物混合物溶液负载在玻璃纤维上；冻干之后，将负载有底物的玻璃纤维被裁成底物垫贴敷于聚氯乙烯垫板上；

(2)负载抗体：用硝化纤维素膜负载捕获抗体和第二抗体；

(3)标记抗体和酶：用金纳米颗粒标记检测抗体和辣根过氧化物酶；

(4)制备层析试纸：用冷冻干燥方法将金标抗体负载在玻璃纤维上作为金标抗体垫；冻干之后，将样品垫、金标抗体垫、硝基纤维素膜和吸水垫贴敷于聚氯乙烯垫板上，并裁成层析试纸；

(5)底物垫与层析试纸集成：将底物垫和层析试纸同时固定于聚碳酸酯定位器具上。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述底物混合物中，鲁米诺的浓度为50～200毫摩每升，优选为80～150毫摩每升，最优选为100毫摩每升；

对碘苯酚的浓度为50～200毫摩每升，优选为80～150毫摩每升，最优选为100毫摩每升；

过硼酸钠的浓度为10～100毫摩每升，优选为30～80毫摩每升，最优选为50毫摩每升。

5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，每条底物垫的长度为3～5毫米，优选为4毫米；每条底物垫的宽度为0.5～2毫米，优选为1毫米。

6.根据权利要求3至5中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述抗体浓度为1.5～2毫克每毫升，优选为捕获抗体1.7毫克每毫升，第二抗体2.0毫克每毫升。

7.根据权利要求3至6中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中：

所述金纳米颗粒的粒径为30～80纳米，优选为50～70纳米，最优选为60纳米；

标记时的抗体浓度为25～100微克每毫升，优选为30～80微克每毫升，最优选为50微克每毫升；和/或

抗体和酶的摩尔比为1：10～20，优选为1:20。

8.根据权利要求3至7中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤(4)中，每条层析试纸的宽度为3～5毫米，优选为4毫米。

9.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：

权利要求1或2所述的集成式免疫层析试纸。

10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒进一步包括：

铝箔袋以及密封在所述铝箔袋中的干燥剂，和/或滴管。