[发明专利]一种细菌纤维素固定化漆酶POPs消减材料的制备方法

权利要求书

1.一种细菌纤维素固定化漆酶POPs消减材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将斜面菌种接种到pH 4.8～6.8种子培养基，在26～30℃、140～200r/min条件下进行动态培养12～36h天制得种子液，以体积百分比8～15％接种量将种子液转接至pH 4.8～6.8的发酵培养基中，每250mL锥形瓶中含有50～100mL发酵培养液，26～30℃静态培养6～8天，在培养液上层获得细菌纤维素薄膜；

2)将步骤1)获得的细菌纤维素薄膜取出，用去离子水缓慢冲洗多次，去除膜表面的菌体及残留的培养基，用质量分数为0.1mol/L NaOH溶液在60～100℃下水浴中处理30～90min至呈白色半透明状取出，再用去离子水反复洗净至中性并在去离子水中浸泡2～5天，将薄膜取出，吸干表面水分，在液氮中速冻或在低温冰箱里冷冻4h，然后进行冷冻干燥24h，得到白色半透明细菌纤维素干膜；

3)将步骤2)获得的细菌纤维素干膜以细菌纤维素为固定化支架采用吸附-交联法固定化方法固定化漆酶，得到细菌纤维素固定化漆酶POPs消减材料。

2.根据权利要求1所述的一种细菌纤维素固定化漆酶POPs消减材料的制备方法，其特征在于：所述步骤1)中的菌种选自无色杆菌、产碱杆菌、根瘤菌和八叠球菌中的一种。

3.根据权利要求1所述的一种细菌纤维素固定化漆酶POPs消减材料的制备方法，其特征在于：所述步骤1)中的种子培养基，以重量百分比，包含：30g/L葡萄糖、6g/L酵母膏、10g/L蛋白胨、1g/L柠檬酸三钠、2g/L硫酸镁。

4.根据权利要求1所述的一种细菌纤维素固定化漆酶POPs消减材料的制备方法，其特征在于：所述步骤1)中的发酵培养基，以重量百分比，包含：30g/L葡萄糖、12g/L酵母膏、12g/L胰蛋白胨、2g/L柠檬酸钠、2g/L硫酸镁、2.7g/L Na₂HPO₄、2g/L KH₂PO₄。

5.根据权利要求1所述的一种细菌纤维素固定化漆酶POPs消减材料的制备方法，其特征在于：所述步骤3)中的吸附-交联法，包括：5～10mL的0.1～10g/L的1000～10000U/g漆酶中加入0.05～0.5g冷冻干燥后的细菌纤维素并使其浸没，在4～25℃下温育和50～80rpm振荡3～5min，然后静置放在4℃条件下吸附8～24h，并加入5～15mL质量百分比为2.5％的戊二醛溶液，在20～30℃，80～100rpm条件下交联反应1～3h，取出细菌纤维素并用pH 5的醋酸钠缓冲溶液清洗1～3次，吸干表面水分，4℃冰箱保存，得到细菌纤维素固定化漆酶POPs消减材料。