[发明专利]一种裸花紫珠DNA条形码标准检测序列及其应用

说明书

本发明公开了一种裸花紫珠的DNA条形码标准检测序列，其序列如SEQ ID NO.1所示，以及基于该标准检测序列的分子鉴定方法。本发明采用可靠的DNA分子鉴定技术，快速、准确的鉴定了裸花紫珠品种，增强了准确性和可靠性。

技术领域

本发明涉及物种鉴定领域，具体涉及一种裸花紫珠条形码标准检测序列及其在物种鉴定中的应用。

背景技术

裸花紫珠(CallicarpanudifloraHook.exArn.)为马鞭草科(Verbenaceae)紫珠属植物，主产于我国海南，是一种海南地道药材，我国广东、广西也有分布。紫珠属植物有一百多个品种，如紫珠、大叶紫珠等。因此，对裸花紫珠的鉴定是入药的基础。目前，传统的形态学鉴定方法非常容易受到物种本身在生长过程中环境、遗传等诸多因素的影响；且在加工炮制过程中形态被严重破坏，因此，运用传统的形态学方法来鉴定裸花紫珠品种有一定的不足，亟需寻求一种新的方法，以弥补传统分类方法的缺陷。

DNA条形码技术(DNA Barcoding)是通过对一个标准目的基因的DNA序列进行分析，从而快速、准确地进行物种鉴定的技术。其中线粒体基因细胞色素C氧化酶1号基因(COI)由于具有较高的进化速率已成为区分物种和研究物种进化关系的一种理想基因。因此,利用COI基因对裸花紫珠进行物种鉴定是一种较好的方法。研究表明DNA条形码可以广泛应用于生物的分类和鉴定，是一种简便、高效、准确的物种鉴定技术，不仅可弥补传统鉴定方法的缺陷，还因其更客观、准确，突破对以往经验的依赖，能够鉴定物种、发现新种和隐种、重建物种等。运用DNA条形码技术，可以很好的对裸花紫珠的品种进行快速、有效的鉴定。

目前尚未公开裸花紫珠DNA条形码鉴定方法，本发明提供的一种关于裸花紫珠DNA条形码标准检测序列及分子鉴定的方法，有利于实现裸花紫珠的快速准确鉴定，缩短鉴定时间。

发明内容

本发明的目的为提供一种裸花紫珠DNA条形码标准检测序列及其在物种鉴定中的应用，能弥补目前以形态学鉴定裸花紫珠方法存在的缺陷，提高裸花紫珠鉴定结果的准确度，易于操作、灵敏度高。本发明的技术方案如下：

本发明提供了一种裸花紫珠DNA条形码标准检测序列，所述条形码标准检测序列为COI基因，其序列如SEQ ID NO:1所示：

TGCAGAATCCCGTGAACCATCGAGTCTTTGAACGCAAGTTGCGCCCGAAGCCATTAGGCCGAGGGCACGTCTGCCTGGGCGTCACGCATCGCGTCGCCCCCCTCCAGCGCACAGCGCTCGCGAGGGGGGCGGAGACTGGCCTCCCGTGCGCCTACGTCGCGCGCGGCCGGCCCAAATGCGATCCCTCGGCGACGCACGTCACGACCAGTGGTGGTTGAACAACGCTCAACTCTCGTGCTGTCGTGCGGCACCGCGTCGTCCGTTCGGGCATCACCAACGACCCAAGGGCGCGTGCACCGCGCCTTCGACCGCGACCCCAGGTCAGGCGGGATCACCCGCTGAGTTTAAGCATATCAATAAGCGGAGGAAAAGAAACTTACGAGGATTCCCCTAGTAACGGCGAGCGAACCGGGAATAGCCCAACTTGAGAATCGGGCGGCCACGCCGTCCGA。

同时，本发明还提供裸花紫珠DNA条形码标准检测序列在鉴定裸花紫珠中的应用。

另外，本发明提供一种裸花紫珠的DNA条形码分子鉴定方法，包括如下步骤：

(1)从待测的裸花紫珠组织中分离提取DNA；

(2)以步骤(1)所得的DNA为模板用一对引物，通过聚合酶链式反应扩增出裸花紫珠COI基因；