[发明专利]水稻OsPCR3基因在培育抗重金属植物中的应用在审
申请号: | 201810720935.5 | 申请日: | 2018-07-03 |
公开(公告)号: | CN108795974A | 公开(公告)日: | 2018-11-13 |
发明(设计)人: | 王飞娟;丁艳菲;贺希格都楞;孙骏威;朱诚;陈志祥;易可可;王俊敏 | 申请(专利权)人: | 中国计量大学 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46;A01H6/82 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 李进 |
地址: | 310000 浙江省杭*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 抗重金属植物 水稻 基因 培育 应用 基因工程技术 抗重金属能力 核苷酸序列 抵抗能力 有效选择 重金属 转入 | ||
1.一种水稻OsPCR3基因在培育抗重金属植物中的应用,其特征在于,所述水稻OsPCR3基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述抗重金属为抗重金属镉元素和铅元素。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述应用包括以下步骤:将所述水稻OsPCR3基因连接至植物过表达载体,并转化目的植物后进行筛选,得到抗重金属植物。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述植物过表达载体为35S-1300-EGFP质粒。
5.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述水稻OsPCR3基因连接至植物过表达载体的方法为:
(a)克隆水稻OsPCR3基因:以水稻总RNA为模板,反转获得cDNA第一链,然后以cDNA第一链为模板,SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示核苷酸序列为引物,进行PCR扩增,获得带酶切位点的水稻OsPCR3基因;
(b)植物表达载体的构建:将步骤(a)扩增获得的带酶切位点的水稻OsPCR3基因分别用KpnI和SalI双酶切,同时用KpnI和SalI双酶切35S-1300-EGFP质粒载体,然后将酶切后的水稻OsPCR3基因与35S-1300-EGFP载体骨架连接,得到含有水稻OsPCR3基因的植物过表达载体。
6.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述转化为通过农杆菌介导进行转化。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于:所述农杆菌介导的方法为将含有水稻OsPCR3基因的植物过表达载体转化至农杆菌后用所述农杆菌对目的植物进行侵染转化,得到抗重金属植物。
8.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述目的植物为禾本科或茄科植物中的一种。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于:所述目的植物为水稻、玉米、高粱、辣椒、番茄、枸杞或烟草中的一种;
更优选的,所述目的植物为水稻或烟草。
10.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述筛选方法为在镉和/或铅胁迫培养下对抗重金属植物进行筛选。
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