[发明专利]一种检测A亚群禽白血病病毒的胶体金试纸条及其制备方法

权利要求书

1.一种检测A亚群禽白血病病毒的胶体金试纸条，其特征在于，所述胶体金试纸条包括底板，依次搭接固定于底板上的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水纸；

所述金标垫上包被有胶体金标记的鼠抗ALV-Agp85囊膜蛋白的单克隆抗体；

所述硝酸纤维素膜上沿样品流动方向依次设有检测线和质控线，所述检测线包被有兔抗ALV-A多克隆抗体，所述质控线包被有羊抗鼠IgG抗体。

2.根据权利要求1所述的胶体金试纸条，其特征在于，所述金标垫上包被有3μg/cm的鼠抗ALV-A gp85囊膜蛋白的单克隆抗体。

3.根据权利要求1所述的胶体金试纸条，其特征在于，所述检测线和质控线之间的距离是7-9mm；优选为8mm。

4.根据权利要求1所述的胶体金试纸条，其特征在于，所述硝酸纤维素膜为whatman硝酸纤维素膜诊断膜。

5.一种检测A亚群禽白血病病毒的试纸卡，其特征在于，包括：权利要求1-4任一项所述的胶体金试纸条和卡槽，所述卡槽具有容置胶体金试纸条的卡腔，卡槽上设置有观察区和加样区，胶体金试纸条设置在卡槽的卡腔内，卡槽的观察区对应胶体金试纸条的硝酸纤维素膜，加样区对应胶体金试纸条的样品垫。

6.权利要求1-4任一项所述的胶体金试纸条的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)调节胶体金溶液的pH为8.8，向胶体金溶液中加入鼠抗ALV-A gp85囊膜蛋白的单克隆抗体，使单克隆抗体的终浓度为10μg/mL；摇床混匀，BSA封闭，离心，弃沉淀；上清液离心，弃上清，将沉淀以重悬液重悬，将玻璃纤维浸泡在重悬液中，取出使其干燥，制备得到金标垫；

(2)将兔抗ALV-A多克隆抗体和羊抗鼠IgG抗体分别转移到硝酸纤维素膜上，形成含有检测线和质控线的硝酸纤维素膜；

(3)在底板上依次搭接固定样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水纸，即制备得到胶体金试纸条。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述胶体金溶液中的胶体金的粒径为15-25nm。

8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，鼠抗ALV-Agp85囊膜蛋白的单克隆抗体在胶体金溶液中的终浓度为10μg/mL。

9.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述重悬液中含有1％BSA、0.5％叠氮钠和0.16％Tris溶液；所述Tris溶液中含有0.02％的Trition X-100，所述Tris溶液的pH为8.5。

10.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，将兔抗ALV-A多克隆抗体用抗体包被液稀释至2.0mg/mL，在预定的检测线位置划线，干燥后即为检测线；将羊抗鼠IgG抗体稀释至0.6mg/mL，在预定的质控线位置划线，干燥后即为质控线。