[发明专利]经遗传修饰的非人动物及其使用方法

说明书

一般而言，本发明涉及表达人多肽的经遗传修饰的非人动物及其使用方法。

本申请是申请日为2013年09月06日、中国申请号为201380046265.9、发明名称为“经遗传修饰的非人动物及其使用方法”的发明申请的分案申请。

对相关申请的交叉引用

本申请要求2012年9月7日提交的美国临时申请流水号61/698,002，和2013年3月8日提交的美国临时申请流水号61/775,171的优先权，每篇的内容通过提及完整收入本文。

发明背景

生物医学研究的目的是更好地了解人生理学以及使用此知识来预防、治疗或治愈人疾病。由于对人受试者进行实验的实际和伦理障碍，许多研究是对小型动物模型(诸如小鼠)进行的。然而，小鼠并不是人，并且自动物实验获得的知识不总是适用于人。在此背景中，用人血液-淋巴样系统(HHLS)再殖(repopulate)的小鼠代表一种用于在体内研究人造血和免疫功能的有用小型动物模型。

HHLS小鼠是通过将人造血干细胞和祖细胞(HSPC)和/或人胎儿组织移植入免疫应答的先天性和适应性分支有缺陷的接受者小鼠中生成的。在20世纪80年晚期开发出HHLS小鼠的第一种模型(Mosier等,1988,Nature335:256-259；McCune等,1988,Science 241:1632-1639；Kamel-Reid和Dick,1988,Science 242:1706-1709)，并且自此以后已经经历了一系列改良(Legrand等,2006,Journal of Immunology 176:2053-2058；Shultz等,2007,Nature Reviews Immunology 7:118-130)。目前作为接受者用于人造血移入的小鼠品系共享三项特征。第一，它们由于编码PRKDC蛋白的基因中的Scid突变(Mosier等,1988,Nature335:256-259；McCune等,1988,Science241:1632-1639)，或者由于两个Rag基因之一的删除(Shultz等,2000,Journal of immunology 164:2496-2507；Traggiai等,2004,Science304:104-107)而缺乏B和T细胞。第二，编码细胞因子受体的共同γ链(γ_c)的Il2rg基因的删除或突变消除IL-15信号传导，并且导致NK细胞的缺失(Traggiai等,2004,Science304:104-107；Ito等,2002,Blood 100:3175-3182)。第三，小鼠巨噬细胞上表达的SIRPA受体和人细胞上的CD47配体之间的相互作用对小鼠巨噬细胞提供抑制信号，并且为人异种移植物赋予吞噬细胞耐受性(Takenaka等,2007,Nature Immunology 8:1313-1323；Takizawa和Manz,2007,Nature Immunology8:1287-1289)。在使用含有Sirpa基因中的天然多态性的NOD遗传背景时(Takenaka等,2007,Nature Immunology 8:1313-1323；Takizawa和Manz,2007,Nature Immunology 8:1287-1289；Legrand等,2011,Proc Natl Acad Sci USA108:13224-13229)或者通过人SIRPA基因的BAC转基因表达(Strowig等,2011,Proc Natl AcadSci USA 108:13218-13223)实现小鼠细胞上表达的SIRPA和人CD47之间的物种间相互作用。在使用NOD Scidγ_c^-/-(NOG(Ito等,2002,Blood100:3175-3182)或NSG(Ishikawa等,2005,Blood 106:1565-1573))或hSIRPA^tg RAG2^-/-γ_c^-/-(SRG(Strowig等,2011,Proc NatlAcad Sci USA108:13218-13223))小鼠作为接受者时在人HSPC移植后实现高水平的人造血细胞移入。