[发明专利]变异型细胞色素蛋白及其应用在审

专利信息
申请号: 201810721942.7 申请日: 2018-07-04
公开(公告)号: CN109206505A 公开(公告)日: 2019-01-15
发明(设计)人: 早出广司;岛崎顺子;森一茂;小岛胜博 申请(专利权)人: 爱科来株式会社;究极酵素国际股份有限公司
主分类号: C07K14/80 分类号: C07K14/80;C12N15/11;C12Q1/32;C12Q1/00
代理公司: 北京三友知识产权代理有限公司 11127 代理人: 庞东成;于洁
地址: 日本*** 国省代码: 日本;JP
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摘要:
搜索关键词: 细胞色素蛋白 血红素结合域 变异型 优选 应用
【权利要求书】:

1.一种变异型细胞色素蛋白,其为在具有3个血红素结合域的细胞色素蛋白中从N末端侧数第1个第1血红素结合域和第2个第2血红素结合域发生了缺失的变异型细胞色素蛋白。

2.如权利要求1所述的变异型细胞色素蛋白,其中,包含所述第1血红素结合域和第2血红素结合域的区域发生了缺失。

3.如权利要求2所述的变异型细胞色素蛋白,其中,包含所述第1血红素结合域和第2血红素结合域的区域相当于序列编号4的第43位~第195位的区域。

4.如权利要求1~3中任一项所述的变异型细胞色素蛋白,其中,细胞色素蛋白为细胞色素C蛋白。

5.如权利要求4所述的变异型细胞色素蛋白,其中,细胞色素C蛋白来源于伯克霍尔德菌(Burkholderia)属微生物。

6.如权利要求5所述的变异型细胞色素蛋白,其中,细胞色素C蛋白来源于(Burkholderia cepacia)。

7.如权利要求1~3中任一项所述的变异型细胞色素蛋白,其中,改变前的细胞色素蛋白与序列编号4具有60%以上的氨基酸序列同一性。

8.如权利要求1~3中任一项所述的变异型细胞色素蛋白,其由序列编号4的氨基酸编号314~425的氨基酸序列、序列编号4的氨基酸编号330~425的氨基酸序列、或在这些氨基酸序列中1个或几个氨基酸发生了置换、缺失、插入或添加的氨基酸序列构成,在该发生了置换、缺失、插入或添加的氨基酸序列中,氨基酸编号334~338的CXXCH基序未被改变。

9.一种DNA,其编码权利要求1~8中任一项所述的变异型细胞色素蛋白。

10.一种重组载体,其包含权利要求9所述的DNA。

11.一种转化细胞,其利用权利要求10所述的重组载体进行了转化。

12.一种氧化还原酶-细胞色素复合体,其包含权利要求1~8中任一项所述的变异型细胞色素蛋白和氧化还原酶的催化亚基蛋白。

13.如权利要求12所述的氧化还原酶-细胞色素复合体,其中,氧化还原酶为葡萄糖脱氢酶。

14.一种生物传感器,其包含权利要求12或13所述的氧化还原酶-细胞色素复合体。

15.一种测定对象物质的测定方法,其特征在于,在权利要求14所述的生物传感器中添加试样,施加电位并测定响应电流,基于响应电流计算出试样中包含的测定对象物质的浓度。

16.如权利要求15所述的测定方法,其中,施加电位对于银/氯化银电极为0~+300mV。

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