[发明专利]检测IFI44L蛋白的试剂在制备试剂盒中的用途

说明书

本发明提供了检测IFI44L蛋白的试剂在制备试剂盒中的用途，该试剂盒用于诊断病毒性感染发热，该试剂用于检测基因IFI44L蛋白表达水平。实验表明，人宿主基因IFI44L蛋白表达水平在有无病毒性感染情况下具有显著的差异，其在病毒性感染发热发生的早期诊断中有较好的诊断价值，用于检测基因IFI44L蛋白表达水平的试剂制备的试剂盒可有效用于诊断病毒性感染引起的发热，能快速、准确鉴定发热是否为病毒性感染引起，具有敏感性高、特异性强的特点，以协助医生作出更好的诊断及更精确的治疗，同时降低患者接受不必要的药物治疗而引起细菌耐药的可能性。

技术领域

本发明涉及生物领域，具体涉及用于诊断病毒性感染发热的试剂盒及检测IFI44L蛋白 的试剂在制备试剂盒中的用途。

背景技术

目前，发热的病因繁多，可达200多种，临床上分为感染性发热和非感染性发热两大 类，而以前者多见。感染性发热以病毒引起者占绝大多数，另外还有细菌、支原体、螺旋体、真菌和寄生虫等。发热性疾病的早期鉴别诊断，一直是儿科临床关注的重点。当前， 使用抗菌剂而非处方药的经验性发热治疗非常普遍，其加剧抗生素药物耐药问题；因此， 迫切需要临床医生对发热患者的致病源进行精确地诊断、区分，以达到正确指导患者使用 抗菌药物，并降低患者不必要的开支。

传统的辅助医生正确处方抗生素的方案的诊断主要是包括培养分离，酶联免疫法，核 酸扩增检测技术。培养分离法被认为是诊断病原体感染的标准方法。该方法也是对于细菌 发热病原体检测常用的方法，其能直观的证实病原体的感染情况，但该法被认为低敏感性， 且有效性是有限的，研究表明在国外某地区大量临床标本中，培养法敏感性仅为64％，特 异性为97％，无法对早期的感染进行有效的诊断，耗时长，成本较高，不属于快速诊断的 方法。酶联免疫吸附法操作简单，所需时间短，灵敏度高，不需要特殊的仪器，尤其适合 大批样品血清学检测，但该方法检测结果的特异性受包被的抗原或抗体纯度的影响较大， 存在交叉感染，不属于快速检测。核酸检测技术主要包括基因芯片法和实时荧光PCR法， 基因芯片本身具备高灵敏的、高通量筛查，并快速地检测出相关发热病原体，但价格相对 昂贵，且需对扩增产物进行分析。实时荧光PCR法是对特定病原体的靶基因进行特异性的 扩增验证，由于引起小儿发热的致热病毒种类众多，多重PCR扩增时，经常会出现引物与引物，探针与引物之间的干扰，引物探针序列数越多，扩增越容易受影响，另一方面受限 于检测仪器，不能把所有致热病原体一次性检测出来。

因此，提供简单、快速、准确鉴定是否病毒性感染的方法有待研究。

发明内容

本申请是基于发明人对以下事实和问题的发现和认识作出的：

2009年，Zaas等确定了宿主基因反应标签作为诊断呼吸道感染的新策略。他们分析了 在健康实验感染志愿者、鼻病毒(HRV)，呼吸道合胞体病毒(RSV)和甲型流感病毒组志愿者中血液基因表达谱，确定“呼吸道病毒感染密切相关基因标签”，这些基因包括RSAD2，IFI44L和LAMP3。2010年，Statnikov A等发表的文章中指出，人宿主基因IFI44L，RSAD2，ID3和FCGR1B广泛参与了对病毒感染的免疫应答。2016年，JA Herberg等利用转录表达 谱分析方法，发现由病毒感染引起的发热，会激活宿主血液白细胞干扰素诱导蛋白44类基 因(Interferon induced protein 44-like gene，IFI44L)表达水平的显著增加，正常人血液白细 胞中，该基因则处于相对稳定的表达水平。基于上述研究背景和发现，发明人利用基因 IFI44L在白细胞中的基因表达水平这特点，作为研究人病毒性感染发热标志物，惊喜地发 现，病毒感染的人宿主基因IFI44L在白细胞中的蛋白表达水平量与正常人宿主基因IFI44L 在白细胞中的蛋白表达水平量呈现极显著差异；且基因IFI44L在白细胞中表达出的蛋白可 用免疫反应简单、快速的检测出；因此，人宿主基因IFI44L在白细胞中的蛋白表达水平结 合免疫反应可作为早期诊断是否为病毒性感染的可靠指标。