[发明专利]基于REIMS直接采样检测南极犬牙鱼脂质组学轮廓的方法在审
申请号: | 201810724111.5 | 申请日: | 2018-07-04 |
公开(公告)号: | CN108982644A | 公开(公告)日: | 2018-12-11 |
发明(设计)人: | 沈清;林亚楠;王苢轩;邓丰田 | 申请(专利权)人: | 浙江工商大学;杭州邦沃森生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N27/62 | 分类号: | G01N27/62;G01N33/487 |
代理公司: | 杭州新源专利事务所(普通合伙) 33234 | 代理人: | 李大刚 |
地址: | 310018 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 脂质 南极 组学 轮廓图 检测 质谱 直接采样 气溶胶 生物信息检测 质量分析器 电刀切割 切片表面 实时检测 脂质分子 质量校准 质谱数据 峰匹配 高通量 灵敏度 鱼组织 质谱仪 中心化 分辨率 比对 鱼类 数据库 引入 研究 | ||
1.基于REIMS直接采样检测南极犬牙鱼脂质组学轮廓的方法,其特征在于,包括以下步骤:
A、使用iKnife电刀切割南极犬牙鱼组织切片表面,形成气溶胶,所述气溶胶经Venturi泵氮气驱动,采用正交方式经PTFE管引入质谱端口后与1.1Ω、3V、500℃的Kanthal A1灯丝碰撞,随后气溶胶中的脂质离子进入质谱仪的StepWave装置并由质量分析器检测,以丙二醇/亮氨酸脑啡肽混合物为辅助溶剂,经针泵注射进样器以0.1mL/min的流量引入端口;质谱仪扫描时间为1秒,扫描范围为m/z 100-1200;以负电离模式收集数据,获得南极犬牙鱼脂质质谱轮廓图;
B、将质谱轮廓图经MassLynx进行峰匹配、滤噪、中心化和质量校准处理,即质谱数据保存为txt文本格式,根据质谱数据得到相对含量为5%以上的离子峰的质荷比和峰面积信息,结合相对含量为10%以上的离子二级质谱碎片、Lipid MS Predictor和LipidMap脂质分子数据库比对确定南极犬牙鱼的脂质组学轮廓。
2.根据权利要求1所述的基于REIMS直接采样检测南极犬牙鱼脂质组学轮廓的方法,其特征在于:步骤A中,所述iKnife电刀的输出功率为25.08W、切割速度为0.49mm/s,所述iKnife电刀切割南极犬牙鱼组织切片表面的切割长度为1.03cm。
3.根据权利要求1所述的基于REIMS直接采样检测南极犬牙鱼脂质组学轮廓的方法,其特征在于:步骤A中,所述丙二醇与亮氨酸脑啡肽的质量比为98:2。
4.根据根据权利要求1所述的基于REIMS直接采样检测南极犬牙鱼脂质组学轮廓的方法,其特征在于:所述南极犬牙鱼的脂质组学轮廓中的磷脂离子的分析为,对南极犬牙鱼脂质组学轮廓图中m/z650-1000区域内的质谱图进行降噪、去同位素等处理,筛选峰面积大于3.00E+05的离子峰,计算其离子质量,根据离子质量测定值推算其化学结构,并使用MS2二级质谱进行验证。
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