[发明专利]基于纳米磁珠-荧光激团的单增李斯特菌快速检测方法有效
| 申请号： | 201810724762.4 | 申请日： | 2018-07-04 |
| 公开（公告）号： | CN108872573B | 公开（公告）日： | 2021-04-30 |
| 发明（设计）人： | 迟海;路萍 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院东海水产研究所 |
| 主分类号： | G01N33/569 | 分类号： | G01N33/569;G01N33/543;G01N33/533 |
| 代理公司： | 上海伯瑞杰知识产权代理有限公司 31227 | 代理人： | 胡永宏 |
| 地址： | 200090 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基于 纳米 荧光 李斯特 快速 检测 方法 | ||
1.基于纳米磁珠-荧光激团的单增李斯特菌快速检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)设计与单增李斯特菌膜上受体蛋白十一异戊烯基焦磷酸磷酸酯酶特异性连接的极性氨基酸肽链YGNGVGC，并在上述肽链C末端连接极性的纳米磁珠及荧光激团；
(2)将步骤(1)中连接有极性的纳米磁珠及荧光激团的极性氨基酸加入到被测样液中，并与缓冲液一起在磁场作用下经磁场吸附、富集和分离进行纯化；其中，所述被测样液中单增李斯特菌进入测试液，其他杂质随缓冲液进入废液中；
(3)通过荧光检测系统检测步骤(2)所述测试液中单增李斯特菌的含量。
2.如权利要求1所述的单增李斯特菌快速检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述纳米磁珠的平均粒径为100nm。
3.如权利要求1所述的单增李斯特菌快速检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述缓冲液为pH7.4的磷酸盐缓冲液，包括浓度分别为140mmol/L、2.7mmol/L、10mmol/L和1.8mmol/L的氯化钠、氯化钾、十二水合磷酸氢二钠和磷酸二氢钾。
4.如权利要求1所述的单增李斯特菌快速检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述磁场的磁场强度为0.5-0.8特斯拉。
5.如权利要求1所述的单增李斯特菌快速检测方法，其特征在于，步骤(3)中，所述极性氨基酸肽链与所述被测样液的质量比为1：20。
6.如权利要求1所述的单增李斯特菌快速检测方法，其特征在于，步骤(3)中，所述荧光检测系统的检测波长为488nm。
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