[发明专利]一种抗原多肽和包含该抗原多肽的试剂盒

说明书

本发明提供了一种抗原多肽，属于生物技术检测技术领域。本发明提供的抗原多肽能够检测血清中的非结构蛋白52K抗体，进而能够检测FAdV‑4病毒感染，而且能够区别自然感染以及灭活疫苗免疫鸡群。

技术领域

本发明涉及生物技术检测技术领域，具体涉及一种抗原多肽和包含该抗原多肽的试剂盒。

背景技术

血清4型禽腺病毒(FAdV-4)属于禽腺病毒属，近年来，国内鸡群由FAdV-4引起的包涵体肝炎、心包积液病例逐渐增多。FAdV-4不仅感染3～7周龄肉鸡，还感染10～20周龄的蛋鸡，给养鸡业造成了巨大的经济损失。由于灭活疫苗的研制及应用，今后如何来鉴别鸡群是自然感染还是处于免疫状态，对FAdV-4有效及时防控至关重要。病毒的非结构蛋白一般只在病毒感染的细胞中表达，而在全整的成熟病毒颗粒中是不存在的。因此，在活病毒感染机体后，由于可产生非结构蛋白，一般能诱导机体产生针对非结构蛋白的特异性抗体；而病毒灭活疫苗中由于不存在非结构蛋白，免疫机体后一般也不产生针对非结构蛋白的抗体。所以针对某些非结构蛋白抗体的检测能够鉴别鸡群是自然感染还是处于灭活疫苗免疫状态。虽然国内外有学者利用血清1型禽腺病毒(FAdV-1)的非结构蛋白33K和100K，建立了可区分FAdV-1自然感染和灭活疫苗接种鸡群的ELISA方法，但目前尚无基于非结构蛋白检测FAdV-4。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抗原多肽，能够检测血清中的非结构蛋白52K抗体，进而能够检测FAdV-4病毒感染。

本发明提供了一种抗原多肽，所述抗原多肽具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。

本发明还提供了一种试剂盒，包括上述技术方案所述抗原多肽、辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡IgG、洗涤液、阳性对照、阴性对照、稀释液、封闭液和硫酸溶液。

优选的，所述洗涤液包括PBS缓冲液和吐温-20，所述PBS缓冲液的pH值为7.4，所述PBS缓冲液与吐温-20的体积比为(900～1100):(0.4～0.6)。

优选的，所述稀释液包括PBS缓冲液、吐温-20和牛血清白蛋白，所述PBS缓冲液的pH值为7.4，所述PBS缓冲液的体积与吐温-20的体积、牛血清白蛋白的质量比为(900～1100)ml:(0.4～0.6)ml:(15～25)g。

优选的，所述封闭液包括PBS缓冲液和牛血清白蛋白，所述PBS缓冲液的pH值为7.4，所述PBS缓冲液与牛血清白蛋白的质量比为(90～110)ml:(1～3)g。

优选的，所述硫酸溶液的浓度为1～3mol/L。

优选的，所述阳性对照包括抗FAdV-4病毒的禽类血清。

优选的，所述阴性对照包括SPF禽类血清。

本发明提供了一种抗原多肽，本发明以FAdV-4的非结构蛋白中的52K为靶点，合成所述抗原多肽，通过检测FAdV-4中的非结构蛋白52K蛋白抗体来检测FAdV-4感染。

本发明实施例的结果显示：本发明提供的抗原多肽能够检测血清中的非结构蛋白52K抗体，进而能够检测FAdV-4病毒感染，而且能够区别自然感染以及灭活疫苗免疫鸡群。

附图说明

图1为非结构蛋白52K不同肽段与FAdV-4人工感染鸡阳性血清反应性；

图2为ELISA特异性试验。

具体实施方式

本发明提供了一种抗原多肽，所述抗原多肽具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列，具体序列如下所示：

KAKPDTVPQGDYDRDMMYRSGQV。