[发明专利]一种火棘籽多肽及其制备方法在审
申请号: | 201810727283.8 | 申请日: | 2018-07-05 |
公开(公告)号: | CN108977485A | 公开(公告)日: | 2018-12-11 |
发明(设计)人: | 金文闻;余龙江;余元涛;敖明章;赵春芳;刘瑶瑶 | 申请(专利权)人: | 华中科技大学 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/34 |
代理公司: | 华中科技大学专利中心 42201 | 代理人: | 许恒恒;李智 |
地址: | 430074 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 火棘 制备 多肽 酶解液 纯净水 匀浆液 浓缩 超声辅助提取 工艺流程设计 真空冷冻干燥 两步酶解法 中性蛋白酶 离心提取 纳滤处理 逆流循环 上层清液 有效解决 真空浓缩 组织细胞 酶制剂 超滤 浸提 灭酶 去渣 水解 冷却 破碎 截留 改进 | ||
1.一种火棘籽多肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将火棘籽原料清洗后,加入至重量为该火棘籽原料重量1~3倍的40~60℃的纯净水中,然后在高压均质机中进行组织细胞破碎得到火棘籽匀浆液;接着,将所述火棘籽匀浆液投入可温控的超声辅助提取罐,添加纯净水,调节pH值至3~7,并使底物质量浓度为5~15%,然后添加酶制剂,所述酶制剂的添加量为所述火棘籽重量的0.2~3%,接着进行逆流循环浸提,浸提温度控制在35~65℃,然后再离心去渣得离心提取液,真空浓缩,得到浓缩浸膏;
所述酶制剂为木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、无花果蛋白酶中的一种或多种;
(2)向所述步骤(1)得到的所述浓缩浸膏中加入6~10倍重量的纯净水,用碱液调pH至6.8~7.2,按底物质量浓度0.5~5%添加中性蛋白酶进行水解,水解温度为30~60℃;水解处理完毕后升温至90~100℃灭酶,接着冷却,然后离心取上层清液,得到火棘籽酶解液;
(3)将所述步骤(2)得到的所述火棘籽酶解液经过截留分子量为4000~8000Da的超滤膜进行过滤,除去大分子杂质,得超滤膜透过液,接着,再将该超滤膜透过液经过截留分子量为150~1000Da的纳滤膜进行过滤,除去部分残留无机盐和小分子杂质,得目标截留酶解液,然后40~60℃减压浓缩至浸膏,真空冷冻干燥后粉碎即可制得火棘籽多肽。
2.如权利要求1所述火棘籽多肽的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中,所述火棘籽原料预先经过浸泡处理,浸泡时间优选为4~6h;
所述组织细胞破碎所采用的均质压力为20~30MPa,历时10~20分钟;
所述调节pH值至3~7具体是采用盐酸溶液;
所述逆流循环浸提的浸提时长为2~5h;
所述离心去渣是在3000~5000rpm的条件下进行的。
3.如权利要求1所述火棘籽多肽的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中,所述碱液为NaOH或Ca(OH)2溶液;
所述水解具体为搅拌水解,所述搅拌水解的时间1h~4h,
所述灭酶的时间10~30min;
优选的,所述离心取上层清液是在3000~5000rpm的条件下进行的。
4.利用如权利要求1-3任意一项所述制备方法得到的火棘籽多肽。
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