[发明专利]一种淫羊藿对照提取物（箭叶）及其应用

权利要求书

1.一种针对箭叶淫羊藿对照提取物溶液或含箭叶淫羊藿/箭叶淫羊藿有效成分的药材的薄层色谱法检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）制备淫羊藿对照提取物

所述淫羊藿对照提取物来源于：对箭叶淫羊藿药材粉末进行多次提取得到不同批次的淫羊藿提取物，然后对不同批次的淫羊藿提取物进行调配，得到箭叶淫羊藿对照提取物；

所述对箭叶淫羊藿药材粉末进行多次提取，是使其含有的朝藿定C和淫羊藿苷的浓度提高，从而得到不同批次的箭叶淫羊藿提取物；

所述箭叶淫羊藿对照提取物中朝藿定C不得低于13.00%且不高于17.00%和淫羊藿苷的含量不得低于3.00%且不高于5.00%；

对所述箭叶淫羊藿对照提取物采用薄层色谱法和高效液相色谱法得到的图谱与其对应的原料药材一致；

对所述箭叶淫羊藿对照提取物采用薄层色谱法检测得到的色谱图中的朝藿定C和淫羊藿苷处的荧光斑点和采用高效液相色谱法检测得到的色谱图在朝藿定C和淫羊藿苷位置处的色谱峰应分别与其对应的化学对照品或其对应的原料药材一致；

该箭叶淫羊藿对照提取物采用以下步骤制备而成：

步骤一、提取：取箭叶淫羊藿药材粉末与乙醇混合，加热回流后过滤，得到滤液1和滤渣1，并将滤液1回收至无乙醇味得到箭叶淫羊藿粗提物；

步骤二、过柱：取箭叶淫羊藿粗提物，以大孔树脂固定，吸附，用纯水洗至无颜色，再以乙醇洗脱至无颜色，合并乙醇洗脱液，回收溶剂至干箭叶淫羊藿精提物；

步骤三、制备箭叶淫羊藿提取物：将所得箭叶淫羊藿精提物，用乙醇溶解，得到箭叶淫羊藿精提物的醇溶液，再加入辅料，蒸干过筛得到箭叶淫羊藿提取物；

步骤四、调配：将不同批次的箭叶淫羊藿提取物进行调配，得到箭叶淫羊藿对照提取物；

所述步骤一中所述的滤渣1按照步骤一的提取方法经过N次提取，并将N次提取收集的滤液与滤液1合并即为提取液，将提取液回收至无气乙醇味得到箭叶淫羊藿粗提物；

所述N为2；

所述步骤一中提取溶液乙醇浓度为50%；

所述步骤一中的箭叶淫羊藿药材粉末与乙醇的重量体积比为1：25；

所述步骤一中的加热回流提取时间为30min；

所述步骤一中的过滤是用中速滤纸；

所述步骤二中箭叶淫羊藿粗提物与大孔树脂固定比例为：1:20；

所述步骤二中箭叶淫羊藿粗提物在大孔树脂吸附时间为：50min；

所述步骤二中箭叶淫羊藿粗提物在大孔树脂洗脱乙醇浓度为：70%；

所述步骤三中箭叶淫羊藿精提物与乙醇的重量体积比：1：2～1:20；

所述步骤三中所用溶解乙醇浓度为80%乙醇；

所述辅料为微粉硅胶；

所述步骤三是在箭叶淫羊藿精提物的水溶液中加入其重量的30%的微粉硅胶；

所述步骤三蒸干后是过110目筛网过滤；

所述步骤三与步骤四之间还包括以薄层色谱法和高效液相色谱法对不同批次的淫羊藿提取物的朝藿定C和淫羊藿苷进行检测的步骤；

所述步骤四中调配的标准为：应使最终得到的对照提取物中朝藿定C不得低于13.00%且不高于17.00%和淫羊藿苷的含量不得低于3.00%且不高于5.00%；

对所述箭叶淫羊藿对照提取物采用薄层色谱法和高效液相色谱法得到的图谱与其对应的原料药材一致；

对所述箭叶淫羊藿对照提取物采用薄层色谱法检测得到的色谱图中的朝藿定C和淫羊藿苷位置处的荧光斑点和采用高效液相色谱法检测得到的色谱图在朝藿定C和淫羊藿苷位置处的色谱峰应分别与其对应的化学对照品或其对应的原料药材一致；

（2）薄层色谱法检测

精密称取上述制备得到的箭叶淫羊藿对照提取物15mg，置5mL容量瓶中，加甲醇4mL，超声处理15分钟，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，过0.22μm滤膜即得箭叶淫羊藿对照提取物溶液；

所述薄层色谱检测条件如下：

薄层板：TLC G60预制板Merck；

点样：药材供试品溶液：2μl，其余样品4μl；条带状点样长8mm；

展开剂：乙酸丁酯：丙酮：甲酸：水=11:2:10:10， 10℃下分层，取上层溶液；

展开方式：于双槽展开缸一侧加展开剂，预平衡15分钟，展开上行9cm；

检视：展开完毕后均匀喷以5%三氯化铝乙醇溶液，薄层板置薄层加热板上105℃加热2分钟，置于紫外灯366nm下检视荧光色谱图像。