[发明专利]一株诱导大豆产生大豆抗毒素的解淀粉芽孢杆菌及其用途

说明书

本发明公开了一株诱导大豆产生大豆抗毒素的解淀粉芽孢杆菌及其用途。该解淀粉芽孢杆菌为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)AT34，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.15480。实验证明，本发明提供的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)AT34 CGMCCNo.15480可以诱导大豆产生大豆抗毒素，相应大豆粉中的大豆抗毒素含量达到5.78mg/g鲜豆重。本发明具有重要的应用价值。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一株诱导大豆产生大豆抗毒素的解淀粉芽孢杆菌及其用途。

背景技术

大豆(Glycine max)是豆科大豆属一年生草本植物，在豆类中营养价值最高。除了大豆本身所固有的异黄酮类化合物具有多种生物学作用外，在压力条件下大豆会产生一种次生代谢产物大豆抗毒素(glyceollins)。大豆抗毒素有大豆抗毒素Ⅰ、大豆抗毒素Ⅱ和大豆抗毒素Ⅲ三种异构体(结构式见图1)，其可以完全抑制雌激素诱导的MCF-7细胞中黄体酮受体的表达，并部分抑制其在BG-1细胞的表达，从而可高效阻断妇科肿瘤的生长和扩散。由此可知，大豆抗毒素是大豆中的又一健康元素。

解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)为芽孢杆菌属，是一种与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)亲缘性很高的非致病细菌，广泛存在于自然界。目前国内外对其研究仅局限于发酵条件优化、降解除草剂丁草胺、抑制植物病原微生物、控制藻类繁殖和动物肠道益生菌等应用领域。

发明内容

本发明的目的是如何诱导大豆产生大豆抗毒素。

本发明首先保护解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)AT34，该菌株已于2018年03月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏编号为CGMCC No.15480。解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)AT34CGMCC No.15480简称为解淀粉芽孢杆菌AT34。

本发明还保护一种菌剂，其含有解淀粉芽孢杆菌AT34。

所述菌剂的用途可为a1)或a2)或a3)：a1)生产大豆抗毒素；a2)生产富含大豆抗毒素的大豆粉；a3)诱导大豆产生大豆抗毒素。

所述菌剂的制备方法，可包括如下步骤：将解淀粉芽孢杆菌AT34接种至细菌培养基并进行培养，获得的菌液即为菌剂。

所述细菌培养基可为LB液体培养基或PDB培养基。所述LB液体培养基的制备方法具体可如下：将10g蛋白胨、10g氯化钠和5g酵母粉溶于去离子水，然后用去离子水定容至1L；121℃灭菌15min。所述PDB培养基的制备方法具体可如下：将5g马铃薯浸粉、15g葡萄糖、10g蛋白胨和5g氯化钠溶于去离子水，然后用去离子水定容至1L；121℃灭菌15min。

所述菌剂的制备方法中，所述培养的具体条件可为：35-39℃(如35-37℃、37-39℃、35℃、37℃或39℃)、100-300rpm(如100-200rpm、200-300rpm、100rpm、200rpm或300rpm)振荡培养10-20h(如10-15h、15-20h、10h、15h或20h)。