[发明专利]一种氟乙酸脱卤酶突变体及其应用

权利要求书

1.一种氟乙酸脱卤酶突变体，其特征在于，所述氟乙酸脱卤酶突变体的序列包括将SEQID NO.1所示的第155位氨基酸残基H、和/或第156位氨基酸残基W进行突变后的序列；所述氟乙酸脱卤酶突变体具有催化溴化底物、尤其是2-溴丁酸底物的活性。

2.如权利要求1所述的氟乙酸脱卤酶突变体，其特征在于，所述氟乙酸脱卤酶突变体的序列包括将SEQ ID NO.1所示的第155位氨基酸残基H、和/或第156位氨基酸残基W突变为天然氨基酸残基后的序列；较佳地，所述氟乙酸脱卤酶突变体的序列还包括将SEQ ID NO.1所示的第219位氨基酸残基Y突变为天然氨基酸残基后的序列。

3.如权利要求1或2所述的氟乙酸脱卤酶突变体，其特征在于，所述第155位氨基酸残基H突变为A、C、D、E、F、G、I、L、M、N、P、Q、S、T、V或W，和/或，第156位氨基酸残基W突变为A、C、D、F、G、I、L、M、P、R、S、T、V或Y，和/或，第219位氨基酸残基Y突变为疏水性氨基酸残基；

较佳地，所述第155位氨基酸残基H突变为I、N、V、F、L、Q、A、C、M、P、T或W，和/或，第156位氨基酸残基W突变为F、M、R、S、T、G、L、A、C、D、I或Y，和/或，第219位氨基酸残基Y突变为F、L或M；

更佳地，所述第155位氨基酸残基H突变为I、N或V，和/或，第156位氨基酸残基W突变为F、M、R、S或T，和/或，第219位氨基酸残基Y突变为F、L或M。

4.如权利要求1～3任一项所述的氟乙酸脱卤酶突变体，其特征在于，所述第155位氨基酸残基H突变为V，

或第156位氨基酸残基W突变为M、T、C、F、S、V、A或L。

5.如权利要求1～4任一项所述的氟乙酸脱卤酶突变体，其特征在于，所述氟乙酸脱卤酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.13、SEQID NO.15、SEQ ID NO.17、SEQ ID NO.19、SEQ ID NO.21、SEQ ID NO.23、SEQ ID NO.25、SEQID NO.27、SEQ ID NO.29、SEQ ID NO.31、SEQ ID NO.33、SEQ ID NO.35、SEQ ID NO.37、SEQID NO.39、SEQ ID NO.41、SEQ ID NO.43、SEQ ID NO.45、SEQ ID NO.47、SEQ ID NO.49、SEQID NO.51、SEQ ID NO.53、SEQ ID NO.55、SEQ ID NO.57、SEQ ID NO.59、SEQ ID NO.61、SEQID NO.63、SEQ ID NO.65、SEQ ID NO.67、SEQ ID NO.69、SEQ ID NO.71、SEQ ID NO.73、SEQID NO.75、SEQ ID NO.77、SEQ ID NO.79、SEQ ID NO.81、SEQ ID NO.83、SEQ ID NO.85、SEQID NO.87、SEQ ID NO.89、SEQ ID NO.91、SEQ ID NO.93、SEQ ID NO.95、SEQ ID NO.97、SEQID NO.99、SEQ ID NO.101、SEQ ID NO.103、SEQ ID NO.105、SEQ ID NO.107、SEQ IDNO.109、SEQ ID NO.111、SEQ ID NO.113、SEQ ID NO.115、SEQ ID NO.117、SEQ ID NO.119、SEQ ID NO.121、SEQ ID NO.123、SEQ ID NO.125、SEQ ID NO.127、SEQ ID NO.129所示；较佳地，所述氟乙酸脱卤酶突变体的核苷酸序列如SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.10、SEQ IDNO.12、SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.16、SEQ ID NO.18、SEQ ID NO.20、SEQ ID NO.22、SEQ IDNO.24、SEQ ID NO.26、SEQ ID NO.28、SEQ ID NO.30、SEQ ID NO.32、SEQ ID NO.34、SEQ IDNO.36、SEQ ID NO.38、SEQ ID NO.40、SEQ ID NO.42、SEQ ID NO.44、SEQ ID NO.46、SEQ IDNO.48、SEQ ID NO.50、SEQ ID NO.52、SEQ ID NO.54、SEQ ID NO.56、SEQ ID NO.58、SEQ IDNO.60、SEQ ID NO.62、SEQ ID NO.64、SEQ ID NO.66、SEQ ID NO.68、SEQ ID NO.70、SEQ IDNO.72、SEQ ID NO.74、SEQ ID NO.76、SEQ ID NO.78、SEQ ID NO.80、SEQ ID NO.82、SEQ IDNO.84、SEQ ID NO.86、SEQ ID NO.88、SEQ ID NO.90、SEQ ID NO.92、SEQ ID NO.94、SEQ IDNO.96、SEQ ID NO.98、SEQ ID NO.100、SEQ ID NO.102、SEQ ID NO.104、SEQ ID NO.106、SEQ ID NO.108、SEQ ID NO.110、SEQ ID NO.112、SEQ ID NO.114、SEQ ID NO.116、SEQ IDNO.118、SEQ ID NO.120、SEQ ID NO.122、SEQ ID NO.124、SEQ ID NO.126、SEQ ID NO.128、SEQ ID NO.130所示。