[发明专利]一种重组病毒及其在制备用于预防或治疗肾脏纤维化的药物中的应用

说明书

本发明涉及基因工程技术领域，特别涉及一种重组病毒及其在制备用于预防或治疗肾脏纤维化的药物中的应用。本发明所提供的技术方案是基于转录因子YY1负性调控于TGFβ1进而缓解肾脏纤维化进展，找到了导致TGFβ1及其靶标基因转录水平下调的关键因子，并提供了一系列包含SEQ ID NO.1序列的重组病毒，尤其是转录因子YY1过表达重组病毒(AAV‑YY1病毒)，其可用于制备预防或治疗肾脏纤维化的药物；因此，本发明所提供的靶标基因序列、重组病毒以及药物在预防或治疗肾脏纤维化方面具有广阔的临床应用前景。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，特别涉及一种重组病毒及其在制备用于预防或治疗肾脏纤维化的药物中的应用。

背景技术

肾脏纤维化以及硬化是导致终末期肾衰竭病人死亡的常见原因之一，而多种疾病均可以引起肾脏纤维化，包括但不限于糖尿病肾病、肾炎及肾脏肿瘤。肾脏纤维化的主要病理改变是毛细血管基底膜的增厚及基底膜区基质的增加，最终导致弥漫性或结节性肾小球硬化；在其发病过程中都伴随着复杂的机体代谢紊乱性改变，其发病机制错综复杂，包括血流动力学、晚期糖基化终末产物、氧化应激、多元醇通路、蛋白激酶C及各种细胞因子的激活等多个方面的相互作用。

近年来，大量的研究表明，多种细胞因子分泌增多和细胞外基质(ECM)代谢异常在糖尿病肾病(DN)发病的各个环节起着重要作用，其中转化生长因子β1(TGFβ1)是引起DN的复杂网络中的关键病理因素，被认为是最重要的促纤维化因子之一。转化生长因子β1(TGFβ1)能增加ECM的合成、抑制ECM的降解，并最终导致ECM在肾小球的异常沉积，从而引起肾小球硬化。并且，已有的研究发现TGFβ1是众多促纤维化因子中最重要的因子之一，在肾脏疾病患者中，TGFβ1可以调节炎症反应，并可通过自我诱生作用，在损伤部位释放更多的TGFβ1以产生放大反应。

众所周知，ECM在肾小球的异常沉积是导致肾小球硬化和肾间质纤维化的重要原因之一。因此，进一步研究TGFβ1对肾脏纤维化的确切发病机制对缓解肾脏纤维化具有重要意义。

然而，目前临床上并没有特异性靶向肾脏纤维化治疗的药物。在基础医学研究中，研究者们往往更多地去关注TGFβ1中和抗体或者小分子抑制剂，但是，中和抗体由于分子量太大，不易达到目标部位；而小分子抑制剂大多会产生细胞毒性，并对机体产生严重的毒副作用。已有研究证明，血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)抑制剂，即ACEI/ARB可以减少尿TGFβ1水平，但是两者联用并未显示相加作用，不能完全阻断TGFβ1的过表达，故只能延缓而不能完全阻滞肾衰竭的进展。此外，也有临床研究表明，将针对TGFβ1的特异性人源性单克隆抗体在临床上用于肾脏纤维化患者，未能延缓肾脏纤维化的进展。

因此，寻找潜在的肾脏纤维化治疗靶点并研发出有效的防治药物具有重大意义。

发明内容

本发明旨在提供一种全新的用于预防或治疗肾脏纤维化的药物。本发明的发明人致力于研究引起TGFβ1转录水平下调的关键因子，以寻找潜在的肾脏纤维化的治疗靶点及有效的防治方法。

具体地，本发明第一方面提供了一种重组病毒，其包含能够使哺乳动物细胞表达外源基因的病毒载体和编码转录因子YY1的核苷酸序列，其中，所述编码转录因子YY1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示：