[发明专利]一种裂解-气相色谱指纹图谱鉴别浙贝母、川贝母和平贝母的方法

权利要求书

1.一种裂解气相色谱法结合指纹图谱鉴别浙贝母、川贝母和平贝母的方法，其特征在于：所述方法按照如下步骤进行制备：

(1)取已知浙贝母、川贝母和平贝母样品，所述的浙贝母、川贝母、平贝母分别取5-6个样品，一共取n个样品，n为整数，15≤n≤18；

(2)分别将所述的样品烘干、研磨，得到各样品的贝母粉末60-100目，分别装入裂解器中，将裂解器连接气相色谱仪进样口，当裂解器温度达到400-500℃时进样，经过极性色谱柱分离检测得到贝母裂解气相色谱图；

所述气相色谱条件为：色谱柱为极性柱；柱箱升温程序为初温40～50℃，以10～20℃/min速率升到250℃，保持5～10min；进样口温度为240～260℃，检测器温度为240～260℃，分流比30～50:1；载气为氮气，流速1.0mL/min；

所述裂解器条件：裂解炉温度：400-500℃；裂解器与气相色谱仪接口温度240～260℃；

(3)将待鉴定的贝母样品按照步骤(2)所述的样品检测相同条件进行操作，得到待鉴定的贝母气相色谱图；

(4)取所述n个已知样品的气相色谱图，选取每个样品共有的M个特征成分的特征峰、M为整数，20≤M≤40，并且所述每个样品的M个特征峰的总面积达到该样品所有峰总面积的90％，在所述的M个特征峰内，选取一个分离较好，峰面积较大、保留时间居中且相对强度较稳定的峰为参照峰，分别求M个特征成分的特征峰与参照峰的相对峰面积，得到M×n的数据库，输入SPSS统计软件进行主成分分析或聚类分析，得到主成分分析散点图或聚类分析图，并在所述的主成分分析散点图或聚类分析图上确定浙贝母、川贝母或平贝母各自的区域；然后取所述的待鉴定的贝母气相色谱图，分别计算所述M个特征成分的特征峰与所述参照峰的相对峰面积，输入SPSS统计软件进行主成分分析或聚类分析，得到所述待鉴定的贝母主成分分析散点图或聚类分析图，根据统计分析结果将待鉴别样品归类为浙贝母、川贝母或平贝母。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(4)中，所述主成分分析按以下方法进行：

取n个已知样品的气相色谱图，分别计算出每个已知样品的M个特征成分的特征峰相对于所述参照峰的相对峰面积数据，得到M×n的数据库，输入SPSS统计软件进行主成分分析，提取得到3个主成分为三维主成分，得到每种样品的三维主成分坐标，并由此做出已知样品的三维主成分分析散点图；三维主成分分析散点图上浙贝母、川贝母或平贝母样品分别占三个区域，分别为浙贝母、川贝母或平贝母；

取待鉴别样品的气相色谱图，计算待鉴定样品的M个特征成分的特征峰相对于所述参照峰的相对峰面积的数据，输入SPSS统计软件进行主成分分析，提取得到相应待鉴别样品的三维主成分，根据待鉴别样品的三维主成分坐标在所述三维主成分分析散点图中的位置与已知浙贝母、川贝母或平贝母样品所在区域最接近的，即为该区域相对应的品种的贝母。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(4)中，所述聚类分析按以下方法进行：

取n个已知样品的气相色谱图，分别计算每个已知样品的M个特征成分的特征峰相对于所述参照峰的相对峰面积数据，得到M×n的数据库，输入SPSS统计软件进行聚类分析，每两样本间用离差平方和Ward’s法连接，以平方欧式距离作为计算方式，输出已知样品的聚类分析图，由图中可知，浙贝母、川贝母或平贝母样品分为三类；

取待鉴别样品的气相色谱图，计算待鉴定样品M个特征成分的特征峰相对于所述参照峰的相对峰面积数据，输入SPSS统计软件进行聚类分析，每两样本间用离差平方和Ward’s法连接，以平方欧式距离作为计算方式，输出所述待鉴别样品聚类分析图，根据待鉴别样品在聚类分析图中的归类位置与所述浙贝母、川贝母或平贝母样品聚为一类的，即将待鉴别样品归类为该贝母样品。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)中，所述裂解器温度达到400～500℃时进样。

5.如权利要求5所述的方法，其特征在于：步骤(2)中，所述贝母粉末为80-100目的粉末。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于：步骤(2)中，所述贝母粉末按如下方法获得：将贝母干燥鳞茎中肉眼可见的根须等杂质剔除，于60℃下烘干3小时，取出冷却至室温后研磨，过80～100目筛，制成贝母粉末。