[发明专利]基于IgG2抗体检测食物过敏原的ELISA试剂盒

说明书

本发明提供的基于IgG2抗体检测食物过敏原的ELISA试剂盒，属于食物过敏原技术领域。所述试剂盒包括以下试剂，包被有食物过敏原的检测板；洗涤缓冲液；样品稀释液；标准品或阳性质控品；生物素标记的抗人IgG2抗体制剂；酶标记的亲和素溶液；底物显色液；终止液。本发明首次选用IgG2来检测食物过敏原，并且是基于间接法制备的ELISA试剂盒，具有检测灵敏性强，准确度高，重现性好的特点，且能够一次处理大批量的样品。实施例证明本发明提供的试剂盒检测灵敏度达到0.5ng/ml。

技术领域

本发明涉及食物过敏原检测的技术领域，具体涉及基于IgG2抗体检测食物过敏原的试剂盒，即食物过敏原特异性IgG2检测试剂盒。

背景技术

过敏性疾病发病率占世界总人口的30％以上，被世界卫生组织列为21世纪的四大非感染性疾病之一。近年来过敏性疾病的发病率显著上升，成为全球关注的公众卫生问题，郭嘉等人对过敏性疾病流行病学调查结果显示，12亿总人口中有22％的人患有过敏性疾病，例如过敏性鼻炎、哮喘、结膜炎、湿疹、食物过敏、药物过敏和严重的过敏反应等，严重影响人们的生活质量和生命安全。

食物过敏原如蛋品，花生，牛奶，黄豆，小麦，树木坚果，鱼类和甲壳类食物，是主要食物过敏原。其中甲壳类食物中，虾过敏原备受关注，据报道0.6％～2.8％的过敏性疾病患者对虾过敏；人们在虾肉中检测出至少13种IgE结合蛋白，但原肌球蛋白被鉴定为惟一的主要过敏原，相对分子质量介于34000～39000之间；据报道，原肌球蛋白是虾、蟹、牡蛎、乌贼等无脊椎动物的重要抗原，具有高度保守的氨基酸序列。鸡蛋过敏中，蛋白比蛋黄更易引起过敏，卵类黏蛋白为主要过敏原；其阳性率在儿童食物过敏中达35％，而成人过敏也高达12％。由于花生过敏反应的严重性及高发性，该过敏原引起医疗机构的广泛关注，据报道食物诱导的过敏反应中，花生过敏占10％～47％。近年来此类疾病日益增多，成为常见病、多发病，是我国健康及经济发展领域需要解决的重大问题。

目前，专利CN1620504A公开了用基于由特定物质的一部分基因得到的信息设计的引物进行PCR，用来测定食物中有无特定物质的方法，在检出食物中所含的微量成分和识别有害的特定物质过敏源方面是优异的，但是该方法依赖已知检测物的引物，但是PCR方法复杂，检测时间长，成本高；专利CN101285840A公开了一种食物中过敏原的检测方法，尽管该方法能够快速简单得到检测结果但是该专利中并未公开相关的检测抗体种类亚型，同时没有公开该方法检测食物过敏原的检测灵敏度和准确性。另外，以飞行质谱的分子量峰和图谱形状为基本参数来鉴定特征性的蛋白点。通过分析过敏原蛋白的特征对食物中过敏原进行检测鉴定，但是需要专门的大型精密仪器，检测成本高，分析困难需要专门的检测人员和分析人员

综上所述，虽然目前研究的有关食物过敏原检测的方法很多，但都存在检测速度慢，成本高，不适合批量检测的问题，而且需要特定的分析仪器进行机读，制约了食物中过敏原检测的发展。最重要的是目前尚无食物过敏原特异性IgG2检测试剂盒存在。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于基于IgG2检测食物过敏原的试剂盒，使该试剂盒具有较强的特异性和较高的灵敏度。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了基于IgG2抗体检测食物过敏原的ELISA试剂盒，包括以下组分：

包被有食物过敏原的检测板；

洗涤缓冲液；

样品稀释液；

标准品或阳性质控品；

生物素标记的抗人IgG2抗体溶液；

酶标记的亲和素溶液；

底物显色液；

终止液。