[发明专利]一种L-瓜氨酸的高效液相检测方法

说明书

本发明涉及一种L‑瓜氨酸的高效液相检测方法，色谱条件为：色谱柱采用氨基键合硅胶柱；以0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液与乙腈的混合溶液作为流动相，且磷酸盐缓冲液与乙腈的体积比为60∶30～40；检测波长为200～210nm；柱温：25～35℃；流动相流速：0.7～1.0mL/min。本发明方法可快速、准确地测定出L‑瓜氨酸的含量，能够减小误差，确保其质量可控，并且操作简单、检测成本低、检测时间短、检测效率高。

技术领域

本发明属于色谱柱技术领域，尤其涉及一种L-瓜氨酸的高效液相检测方法。

背景技术

L-瓜氨酸，是一种α氨基酸，是从鸟氨酸及胺基甲醯磷酸盐在尿素循环中生成，或是透过一氧化氮合酶(NOS)催化生成精氨酸的副产物。首先精氨酸会被氧化为N-羟基-精氨酸，然后再氧化成瓜氨酸并释出一氧化氮。L-瓜氨酸可以使人的血管获得松弛，可用于增强男性性功能，以及治疗性功能障碍，并能够维护健康的肺功能，提高脑力清晰度，有帮助脑神经细胞贮藏与调回讯息的功能。

L-瓜氨酸在生产过程中需要对其含量进行质量检测。现有技术中公开有显色法和氨基酸分析仪检测法两种，但显色法操作步骤复杂，需要衍生，同时限制条件较高；氨基酸分析仪走针时间长，并且样品处理时间长，试剂配制条件要求较高。

发明内容

针对现有技术中检测L-瓜氨酸存在的操作步骤复杂、前处理时间长的问题，本发明提供一种L-瓜氨酸的高效液相检测方法。

为达到上述发明目的，本发明实施例采用了如下的技术方案：

一种L-瓜氨酸的高效液相检测方法，色谱条件如下：

色谱柱：氨基键合硅胶柱；

流动相：0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液与乙腈的混合溶液；所述磷酸盐缓冲液与乙腈的体积比为60∶30～40；

检测波长：200～210nm；

柱温：25～35℃；

流动相流速：0.7～1.0mL/min。

本方法所提供的色谱条件能使样品色谱峰与杂质峰达到很好的分离效果，能够准确测定出待测样品中L-瓜氨酸的含量，可用于在生产L-瓜氨酸过程中进行含量检测。并且本发明所采用的高效液相色谱法在同样的时间内可以检测多个样品，当样品数量较多时，能显著提高检测的工作效率，节省了人工、时间和溶剂等成本。

优选地，所述流动相中所述磷酸二氢钾缓冲液与乙腈的体积比为60∶35，在该比例下可以获得更完善的峰形。

优选地，所述检测波长为205nm。

优选地，所述柱温为30℃。柱温范围接近室温，容易控制温度使其稳定，样品在该温度范围内分离良好。

优选地，上述L-瓜氨酸的高效液相检测方法包括如下步骤：

步骤a、配制L-瓜氨酸的对照品溶液；

步骤b、用所述色谱条件对所述对照品溶液进行高效液相色谱检测，根据所得峰面积绘制L-瓜氨酸对照品的标准曲线，得出L-瓜氨酸对照品的浓度-峰面积线性回归方程；

步骤c、提供待测样品，用所述色谱条件对所述待测样品进行检测，将得到的峰面积代入所述浓度-峰面积线性回归方程，计算所述待测样品中L-瓜氨酸的含量。

相对于现有技术而言，本发明采用高效液相色谱法的操作步骤中，样品的处理方法简单、操作便捷，能够提高工作效率。

具体地，上述步骤a中所述L-瓜氨酸对照品溶液至少为5份，其浓度范围为0.6～1.4mg/mL，溶剂的组成与流动相相同。在该浓度范围内的L-瓜氨酸溶液可以得到线性良好的标准曲线。以流动相为溶剂，可避免引入其他杂质对实验结果产生干扰。