[发明专利]一种纤维蛋白溶酶原免疫比浊法检测试剂盒

说明书

本专利提供一种纤维蛋白溶酶原免疫比浊法检测试剂盒。通过在试剂R1中加入海藻糖,使反应体系更加粘稠,且相对地中性,在一定程度上解决了抗体在稀溶液中不稳定这一难题,从而对抗体起到一定的保护作用；同时在试剂R2中加入羊抗人Pg抗体包被胶乳颗粒而不是羊抗人Pg抗体,从而在根源上对抗体起到了一定保护作用。因此,海藻糖与胶乳颗粒共同作用有效地增强了试剂盒的稳定性,却不会对试剂的准确度产生影响,有利于该试剂在市场中进一步的推广。

技术领域

本发明涉及临床体外检测试剂技术领域,特别涉及一种纤维蛋白溶酶原免疫比浊法检测试剂盒。

背景技术

人纤维蛋白溶酶原是人纤维蛋白溶酶的前体物质,没有活性。在正常人体内,人纤维蛋白溶酶原通过纤维蛋白溶酶原激活因子激活转变成有活性的人纤维蛋白溶酶。人纤维蛋白溶酶原(Plasminogen,Pg)是1种血浆蛋白,主要由肝细胞产生,血浆中的含量为0.06-0.25mg/mL。该蛋白能够被纤维蛋白溶酶原激活因子激活,转变成有活性的纤维蛋白溶酶后发挥各种生理作用。

纤维蛋白溶酶原是纤溶酶的前体形式,由激活物激活,进而水解纤维蛋白(原)和其它的凝血因子,起到抗凝的作用。纤溶酶的作用是保持血管内的凝血、纤溶的平衡,使血流畅通。纤维蛋白溶酶原主要生理功能是参与纤溶系统。纤维蛋白溶酶原在血清中处于非活性状态,可被尿激酶、链激酶、胰蛋白酶、凝血酶等物质激活。激活后的纤维蛋白溶酶原转变为纤溶酶,它可以水解凝固的纤维蛋白,从而使得沉淀附着于血管壁的纤维蛋白得以逐渐溶解,起到抗凝的作用。严重创伤、灼伤、外科手术、产科意外、输血反应等病理情况时,纤溶系统被过度激活,致使大量的纤维蛋白溶酶原转变为纤溶酶,其活力过强,超过了抗纤溶酶的抑制能力,这时就会导致纤溶过度而致出血。纤溶过度也是血管内弥散性凝血的重要特征。

对纤维蛋白溶酶原的检测主要是免疫比浊法,但是该方法用到抗体, 所以普通的纤维蛋白免疫比浊法检测试剂稳定性不好,准确度和灵敏度也不高,因而限制了其在临床上的推广应用。

发明内容

本发明在抗原-抗体特异性结合法的基础上,优化反应体系,通过使用羊抗人Pg抗体包被胶乳颗粒和海藻糖,显著改善了试剂的准确度、分析灵敏度和稳定性等,是一种更加稳定、抗干扰能力强的纤维蛋白溶酶原检测试剂。

本发明是通过以下措施实现的：

一种纤维蛋白溶酶原免疫比浊法检测试剂盒,其特征在于,它包含试剂R1、试剂R2和校准品,其中试剂R1组成为：100mmol/LpH 7.6Mes 缓冲液、25ml/LTritonX-100、28g/L海藻糖；试剂R2组成为：100mmol/L pH 7.6Mes缓冲液、30ml/L羊抗人Pg抗体包被胶乳颗粒、7.7mmol/L叠氮钠。

所述试剂R1和试剂R2在使用时的比例为R1：R2＝225：75。

本发明所使用的校准品为久峰润达生物技术有限公司生产的Pg校准品。

本发明的试剂盒在具有双试剂功能的自动生化分析仪东芝120上进行,其具体使用方法见图4。

加入生理盐水、样本或校准品3μl,之后再加入R1试剂225μl预孵育5min后读取吸光度A1,之后再加入75μl的试剂R2反应5min后,读取吸光度A2,并计算ΔA。

本发明的有益效果：

本发明提供的纤维蛋白溶酶原免疫比浊法检测试剂盒,通过在试剂R1中加入海藻糖,使反应体系更加粘稠,且相对地中性,在一定程度上解决了抗体在稀溶液中不稳定这一难题,从而对抗体起到一定的保护作用；同时在试剂R2中加入羊抗人Pg抗体包被胶乳颗粒而不是羊抗人Pg 抗体,从而在根源上对抗体起到了一定保护作用。因此,海藻糖与胶乳颗粒共同作用有效地增强了试剂盒的稳定性,却不会对试剂的准确度产生影响,有利于该试剂在市场中进一步的推广。

附图说明