[发明专利]一种甲硝唑栓微生物限度检查方法

说明书

本发明公开了一种甲硝唑栓微生物限度检查方法，包括以下步骤，供试液制备：将甲硝唑栓加在稀释剂中，在40℃水浴中保温10min，用匀浆仪反复拍打1min，作为1:20供试液；在试管一中加入微生物进行薄膜过滤，过滤过程中按体积量取300份的pH7.0无菌氯化钠‑蛋白胨缓冲液进行分次冲洗，过滤完成后取出滤膜，培养48h并计数，作为对照样本；按体积量取甲硝唑栓1：20的供试液4份，加到装有100份pH7.0无菌氯化钠‑蛋白胨缓冲液的试管二中在40℃水浴中保温，摇匀，加入微生物进行薄膜过滤，过滤过程用300份的pH7.0无菌氯化钠‑蛋白胨缓冲液进行分次冲洗，过滤完成后取出滤膜，面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基上培养48h并计数，并与试管一中的对照样本进行对照。

技术领域：

本发明属于医药技术领域，尤其是涉及一种甲硝唑栓微生物限度检查方法。

背景技术：

甲硝唑栓主要成份为甲硝唑，基质为脂肪酸甘油酯、甘油、明胶、液体石蜡、香果酯等，甲硝唑能够抑制细菌的脱氧核糖核酸的合成，从而干扰细菌的生长、繁殖，最终致细菌死亡，甲硝唑栓有抑制微生物生长的作用。甲硝唑栓基质含大量脂溶性成分，难溶于水。

各个企业采用不同方式，解决供试液均一性和消除抑菌作用，部分企业用十四烷基异丙酯萃取方式；另外企业采用吐温-80助溶，体积高到40％，泡沫量大，不易过滤提取方法。在洁净区采用剧烈振摇，不符合洁净区试验管理办法，有机溶剂萃取、振摇造成微生物损伤，污染环境。

发明内容：

本发明所要解决的技术问题是：提供一种甲硝唑栓微生物限度检查方法，避免在洁净区振摇、萃取，减少对药品中微生物损伤。

为了解决上述技术问题，本发明是通过以下技术方案实现的：一种甲硝唑栓微生物限度检查方法，包括以下步骤，

S1、供试液制备：将甲硝唑栓加在稀释剂中，在40℃水浴中保温10min，用匀浆仪反复拍打1min，作为1:20供试液；

S2、在试管一中加入微生物进行薄膜过滤，过滤过程中按体积量取300份的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液进行分次冲洗，过滤完成后取出滤膜，面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基上培养48h并计数，作为对照样本；

S2、按体积量取甲硝唑栓1：20的供试液4份，加到装有100份pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液的试管二中在40℃水浴中保温，摇匀，加入微生物进行薄膜过滤，过滤过程用300份的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液进行分次冲洗，过滤完成后取出滤膜，面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基上培养48h并计数，并与试管一中的对照样本进行对照。

作为优选，步骤S1中的稀释剂选用吐温-80或十四烷基异丙酯。

作为优选，步骤S2和S3中每次使用100份pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液进行分次冲洗，共计冲洗三次。

作为优选，步骤S2和S3加入进行薄膜过滤的微生物为金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、黑曲霉菌悬液(小于100cfu)。

与现有技术相比，本发明的有益之处是：本发明采用加吐温-80助溶，在40℃水浴中保温，保证供试液均一性。方法简单，易于操作。避免在洁净区振摇、萃取，减少对药品中微生物损伤。

附图说明：

图1是稀释剂选择测试结果图。

图2是吐温-80对阳性菌生长的影响结果图。

图3是冲洗液类型选择测试结果图。

图4是冲洗液体积选择测试结果图。

图5是甲硝唑栓方法适用性试验结果图。

具体实施方式：

下面结合具体实施方式对本发明进行详细描述：