[发明专利]一种有效提高实验动物甲状旁腺组织病理制片切出率的方法

说明书

本发明公开了一种有效提高实验动物甲状旁腺组织病理制片切出率的方法，包括如下步骤：实验动物安乐死后→解剖→将甲状旁腺连同甲状腺一同取出→10%的中性福尔马林固定→苏木素溶液进行标记→脱水→石蜡包埋→切片→染色。通过与传统制作方法进行对比研究发现，新的制片方法可将动物甲状旁腺切出率从原来的50%‑70%提高到100%，且该方法简单，易于掌握，可广泛推广应用于实验动物甲状旁腺制片，有效防止甲状旁腺切片过程中丢失或无法切出。

技术领域

本发明涉及一种有效提高实验动物甲状旁腺组织病理制片切出率的方法，属于病理技术新方法领域。

背景技术

新药临床前安全性评价的单次给药及重复给药毒性试验中，甲状旁腺是国家药品监督管理局颁布的指导原则要求检查的组织脏器。由于甲状旁腺太小，部位不规则，传统做法不易切出，导致部分动物甲状旁腺切片观察记录缺失。特别是有些药物作用的靶器官是甲状旁腺时，可能会由于甲状旁腺切出率太低而影响试验结果的正确判断，从而严重影响试验质量及资料的完整性。

传统甲状旁腺切片为先将甲状旁腺连同甲状腺一同取出→10％的中性福尔马林固定→脱水→石蜡包埋→切片→染色。由于甲状旁腺太小，部位不规则，经常导致甲状旁腺组织无法切出，造成甲状旁腺组织丢失，严重影响试验质量。

发明内容

为了克服上述缺陷，本发明的目的是提供一种有效提高实验动物甲状旁腺组织病理制片切出率的方法，可有效防止修片时造成的甲状旁腺丢失和不易切出，能非常显著提高甲状旁腺的切出率，保证试验结果的准确性和试验资料的完整性。

为了实现上述发明目的，本发明所采用的技术方案为：一种有效提高实验动物甲状旁腺组织病理制片切出率的方法，其特征在于，包括如下步骤：实验动物安乐死后→解剖→将甲状旁腺连同甲状腺一同取出→10％的中性福尔马林固定→苏木素溶液进行标记→脱水→石蜡包埋→切片→染色。

所述的苏木素溶液为以下溶液中的任意一种：

苏木素溶液1：硫酸铝钾：15g，无水乙醇：10mL，苏木精：1g，蒸馏水：200mL，氧化汞：0.5g，冰醋酸：10mL；

苏木素溶液2：硫酸铝钾：50g，无水乙醇：50mL，苏木精：5g，蒸馏水：650mL，碘酸钠：0.5g，冰醋酸：20mL，甘油：300mL；

苏木素溶液3：硫酸铝钾：17g，无水乙醇：250mL，苏木精：2g，蒸馏水：mL，碘酸钠：0.2g，冰醋酸：20mL；

苏木素溶液4：硫酸铝钾：3g，无水乙醇：100mL，苏木精：2g，蒸馏水：100mL，碘酸钠：0.5g，冰醋酸：10mL。

固定好的甲状腺用无尘纸擦干，查看甲状旁腺所在的位置，将牙签的尖头磨钝，蘸染色用的苏木素溶液将甲状旁腺染色，待苏木素溶液干后和其它组织一起脱水；包埋时，将两侧有苏木素颜色的部位包埋在同一水平位置；切片时，组织粗修，靠近苏木素标记的部位时，仔细观察，待甲状旁腺修出后，切片。

苏木素溶液用于标记甲状旁腺。所述的苏木素溶液可选用不同于苏木素溶液1-4组成的配比。

前述的方法应用于所有种属动物甲状旁腺组织病理学制片。

苏木素溶液是一种细胞核染色剂，苏木素标记的组织会对细胞核染色，脱水不会掉色，不影响组织切片制作和观察。

本发明中甲状旁腺组织切片的制片流程为：实验动物安乐死后→解剖→甲状旁腺连同甲状腺一同取出→10％的中性福尔马林固定→苏木素溶液进行标记→脱水→石蜡包埋→切片→染色，该方法较传统不标记方法可有效防止修片时造成的甲状旁腺丢失和不易切出，能非常显著提高甲状旁腺的切出率，保证试验结果的准确性和试验资料的完整性，更好地提高试验质量。