[发明专利]一种硬组织病理切片展片的方法及装置

说明书

本发明公开了一种硬组织病理切片展片的方法及装置，包括如下步骤：1）取材固定，脱水、透明、渗透包埋，砂轮机修块；2）硬切块表面均匀涂抹OCT包埋剂并切片；3）将切好的硬组织切片置于45‑52℃热水中，组织切片展开；4）用铬矾明胶包被的载玻片捞起硬组织切片；5）玻璃盖玻片均匀涂抹凡士林，并置于粘附组织切片的载玻片上；6）将玻片置于压片装置中，均匀施加压力，将放有玻片的压片装置放入60℃烘箱中烘烤2小时；7）从烘箱中取出玻片，移去盖玻片，置于二甲苯中脱去凡士林，自然晾干后待用。本发明展片方法及压片装置操作方便，可重复性强，同时有效避免了硬组织切片皱缩、脱片等问题，显著提高了展片效果，适合不同组织工程骨研究。

技术领域

本发明涉及生物学或者医学中病理组织切片制备技术领域，具体涉及一种用于硬组织病理切片展片的新方法。

背景技术

骨组织是由细胞、基质和纤维构成的一种质地坚硬的结缔组织，骨组织中沉积的无机盐以羟基磷灰石形式存在，其主要成分为磷酸钙和碳酸钙。由于骨组织硬脆致密、难切易碎，因此在临床、教学和科研中，对骨组织直接进行切片较为困难。常规骨组织采用脱钙后石蜡包埋切片，处理过程中常导致酶活性降低，骨组织形态结构改变，无法进行组织学观察，且不能对组织钙分布、矿化程度等进行研究。近年来硬组织的研究发展迅速，大多研究指标必须通过非脱钙硬组织切片进行检测，硬组织切片不破坏骨组织的结构和成分，在观察中不失真，对研究骨组织内成分、骨形成有重要作用。

然而，当前实验室普遍采用的硬组织切片展片的方法是将切片粘附于普通玻璃载玻片，同时使用塑料盖玻片盖片，后置于60℃烘箱中烘烤。该操作对于硬组织贴片效果一般，组织切片易起褶皱，展片效果不理想，组织切片也经常出现破裂，且后续实验操作中极易脱片，直接影响病理专家对硬组织切片的组织学评价。

综上所述，硬组织切片不能高质量切片、展片是临床及科研中亟待解决的难题。传统方法均存在展片不佳和脱片两方面的弊端，严重限制了临床和科研检测的进程，影响了实验检测结果的真实性。因此如何突破目前硬组织切片展片技术的困境，同时探索更为合适的切片展片方法是非常迫切的科学问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种硬组织病理切片展片的新方法及装置。该方法解决了硬组织切片中贴片效果差、切片不完整、切片皱缩和粘片导致的组织破裂等技术问题，而且本发明操作简单方便，展片效果明显，重复性好。

为了达到上述目的，本发明提供的技术方案为：

所述硬组织病理切片展片的方法包括如下步骤：

1)取组织病理材料并固定，脱水透明后进行渗透和包埋处理，再用砂轮机修块，得硬切块；

2)将硬切块表面均匀涂抹OCT包埋剂后切片，得切好的硬组织切片；优选地，切片时的切片机型号为LEICA RM2255型，配钨钢刀；

3)将硬组织切片置于45—52℃，优选为48℃热水中，使硬组织切片展开，优选地，将硬组织切片置于热水中的时间为3—5s；

4)用明胶和硫酸铬钾包被的载玻片捞起展开的硬组织切片；

5)在玻璃盖玻片均匀涂抹凡士林后，将盖玻片置于粘附有硬组织切片的载玻片上；

6)将玻片置于压片装置中，均匀施加压力，于55—65℃，优选为60℃烘箱中烘烤1.5—2.5h，优选为2h；

7)从烘箱中取出玻片，移去盖玻片，将载玻片于二甲苯中脱去凡士林，自然晾干后待用。