[发明专利]一种制备6’-丙二酰甲酰基人参皂苷F1的方法

说明书

本发明公开了一种制备6’‑丙二酰甲酰基人参皂苷F1的方法，包括：步骤1、取人参花蕾，粉碎，用95％乙醇热回流提取，浓缩成膏状即为总提物；步骤2、将总提物用25％乙醇溶解调整浓度为0.2g生药/mL，过滤，上样量为0.8BV，LX‑68大孔吸附树脂柱的柱床径高比为1:9，先用3BV的40％乙醇除杂，再用9BV的75％乙醇洗脱，收集8‑9BV的75％乙醇洗脱液，减压浓缩至无醇味后冷冻干燥得到粗品冻干粉；步骤3、高速逆流分离，溶剂体系为体积比1:18:1:18:0.5的正丁醇/乙酸乙酯/甲醇/水/氯仿，根据色谱图收集6’‑丙二酰甲酰基人参皂苷F1对应的洗脱流份，浓缩至干得6’‑丙二酰甲酰基人参皂苷F1。

技术领域

本发明属于化学领域，具体涉及一种制备人参皂苷F1衍生物的方法，人参皂苷F1衍生物包括3-乙酰基人参皂苷F1、6’-乙酰基人参皂苷F1和6’-丙二酰甲酰基人参皂苷F1。

背景技术

前期研究发现，3-乙酰基人参皂苷F1、6’-乙酰基人参皂苷F1、6’-丙二酰甲酰基人参皂苷F1具有优异的酪氨酸酶抑制活性，可以用于制备美白化妆品。从化学结构上看，3-乙酰基人参皂苷F1、6’-乙酰基人参皂苷F1、6’-丙二酰甲酰基人参皂苷F1为人参皂苷F1的衍生物，但是人参皂苷F1对酪氨酸酶的抑制活性极弱，远不如其衍生物。

目前，分离制备3-乙酰基人参皂苷F1、6’-乙酰基人参皂苷F1、6’-丙二酰甲酰基人参皂苷F1必须依赖于反复硅胶柱层析，但是，反复硅胶柱层析死吸附强，损失大，根本不适用于规模化制备。而大孔树脂和高速逆流不仅样品损失少，而且易于规模化使用。若能够通过大孔树脂和高速逆流色谱的组合使用就分离得到3-乙酰基人参皂苷F1、6’-乙酰基人参皂苷F1、6’-丙二酰甲酰基人参皂苷F1，必然具有广阔应用前景。

发明内容

本发明的目的在于提供一种制备人参皂苷F1衍生物的方法，人参皂苷F1衍生物包括3-乙酰基人参皂苷F1、6’-乙酰基人参皂苷F1和6’-丙二酰甲酰基人参皂苷F1。

本发明目的是通过如下技术方案实现的：

一种制备3-乙酰基人参皂苷F1的方法，包括如下步骤：

步骤1、总提物的制备

取干燥的人参花蕾，用粉碎机粉碎，过筛，得人参花蕾粉末。随后用95％乙醇热回流提取，浓缩成膏状即为总提物。

步骤2、大孔树脂富集

将总提物用25％乙醇溶解调整浓度为0.2g生药/mL，过滤，上样量为0.8BV，LX-68大孔吸附树脂柱的柱床径高比为1:9，先用3BV的40％乙醇除杂，再用9BV的75％乙醇洗脱，收集8-9BV的75％乙醇洗脱液，减压浓缩至无醇味后冷冻干燥得到粗品冻干粉。

步骤3、高速逆流分离

(1)两相溶剂系统配制

两相溶剂系统为体积比1:18:1:18:0.5的正丁醇/乙酸乙酯/甲醇/水/氯仿，将各溶剂按照体积比例加入分液漏斗中，剧烈振摇使充分混合，后静置分层。将上相和下相分别放置不同容器，超声脱气待用。

(2)样品溶液配制

取粗品冻干粉用溶剂系统下相超声溶解配制成浓度为10mg/mL的溶液，即为样品溶液。

(3)HSCCC分离

将配制好的溶剂系统上相泵入HSCCC螺旋管中作为固定相，待上相完全充满整个柱子，打开高速逆流色谱仪，设置转速900r/min、体积流量1.5mL/min、检测波长210nm，将溶剂系统下相泵入螺旋管中，待流动相开始从检测器尾端持续流出时，表明螺旋管内两相溶剂达到流体动力学平衡。进样阀注入10mL样品溶液，开始记录色谱图并持续泵入流动相分离。

(4)目标化合物流份收集