[发明专利]碳酸盐辅助提取微藻油脂并吸收二氧化碳循环培养的方法

权利要求书

1.一种碳酸盐辅助提取微藻油脂并吸收二氧化碳循环培养的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将所收获的微藻培养液浓缩成微藻浓缩液，再添加碳酸盐及1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯，得到反应液，进行反应和细胞破壁；

(2)在步骤(1)反应后的液体中加入有机试剂进行盐析萃取，得到有机相、水相；

(3)在步骤(2)中得到的水相中通入二氧化碳至pH值6.5～10.0后，并以一定比例添加至微藻培养基中培养微藻，重复步骤(1)～(3)；

步骤(1)中所述碳酸盐为碳酸钠或碳酸钾，所述碳酸盐与微藻浓缩液中水的质量比为1:3～5；

步骤(1)中所述1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯与微藻浓缩液中水的质量比为1:5～7.5；

步骤(1)的反应条件为：加热温度85～90℃，加热时间80～100min；

步骤(2)中所述有机试剂为甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、正丁醇、氯仿或正己烷。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所得的水相中通入二氧化碳时，回收其中沉淀下来的碳酸氢盐，并对剩余水相回收利用，重新用于微藻培养。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述有机试剂的质量分数为3～15％。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述盐析萃取的反应温度为30～60℃。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述水相与微藻培养基体积比例为1:9～99。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(2)中得到的有机相中加入氯仿及浓硫酸，进行转酯化反应。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，单位体积的有机相加入2～4倍体积的氯仿和0.1～0.5倍体积的浓硫酸，在85～95℃下反应1～2h。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述微藻为绿藻门或硅藻门。

9.根据权利要求1或8所述的方法，其特征在于，所述微藻为富油新绿藻（ Neochloris oleoabundans ） 、小球藻（ Chlorella sp. ） 、杜氏藻（ Dunaliella sp. ） 或微拟球藻（ Nannochloropsissp. ）。