[发明专利]鸡白蛋白-干扰素α-白介素2融合蛋白、制备方法及其编码基因、一种鸡长效干扰素

权利要求书

1.鸡白蛋白-干扰素α-白介素2融合蛋白，其特征在于：所述融合蛋白的氨基酸序列表如SEQUENCE LISTING 400〈1〉所示，记为融合蛋白1。

2.一种编码如权利要求1所述的鸡白蛋白-干扰素α-白介素2融合蛋白的基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列表如SEQUENCE LISTING 400〈2〉所示，记为基因组1；或如SEQUENCE LISTING 400〈3〉所示，记为基因组2。

3.含有如权利要求2所述基因的表达载体。

4.含有如权利要求2所述基因的基因工程菌。

5.权利要求1所述的鸡白蛋白-干扰素α-白介素2融合蛋白的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：将含有核苷酸序列表如SEQUENCE LISTING 400〈2〉所示的基因组1或核苷酸序列表如SEQUENCE LISTING 400〈3〉所示的基因组2的表达载体导入到大肠杆菌宿主细胞中，获得基因工程菌，基因工程菌经IPTG诱导表达后得到所述融合蛋白的粗品，经纯化后即可得到融合蛋白。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述基因工程菌为pET-32a/rAlb-IFNα-IL2，其制备方法为：

(1)、设计引物，通过反转录获得或人工分别合成连接有柔性linker序列的鸡白蛋白、鸡干扰素α和鸡白细胞介素2的目的基因；通过柔性linker将鸡白蛋白、鸡干扰素α、鸡白细胞介素2的目的基因连接起来，连接后的目的基因的核苷酸序列表如SEQUENCE LISTING400〈2〉所示或如SEQUENCE LISTING 400〈3〉所示；

(2)、将连接后的目的基因连接到pET-32a质粒上获得表达载体；

(3)、将表达载体导入到大肠杆菌宿主细胞中，即可得到基因工程菌pET-32a/rAlb-IFNα-IL2。

7.根据权利要求5或6所述的制备方法，其特征在于，所述大肠杆菌宿主细胞为BL21(DE3)感受态细胞或带有pGro7质粒的BL21(DE3)感受态细胞。

8.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述纯化的方法为：融合蛋白的粗品先后经亲和层析、阴离子交换层析和分子筛层析纯化。

9.一种鸡长效干扰素，其特征在于，所述鸡长效干扰素由权利要求1所述的融合蛋白与冻干保护剂混配之后，经冷冻干燥而成。

10.根据权利要求9所述的鸡长效干扰素，其特征在于，所述冻干保护剂为甘油、甘露醇和蔗糖。