[发明专利]肉食兽阿留申病毒和猫泛白细胞细小病毒二联直接PCR检测试剂与检测试剂盒及应用有效
申请号: | 201810753926.6 | 申请日: | 2018-07-10 |
公开(公告)号: | CN108823334B | 公开(公告)日: | 2021-10-26 |
发明(设计)人: | 邵西群;章秀婷;杨福合 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院特产研究所 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12R1/93 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 吴啸寰 |
地址: | 130112 吉林省长*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 肉食 兽阿留申 病毒 泛白 细胞 细小 二联 直接 pcr 检测 试剂 试剂盒 应用 | ||
1.病毒检测的检测试剂,其特征在于,所述检测试剂包括动物源成分的检测引物组合;所述检测引物组合包括检测阿留申病毒的第1引物对和检测猫泛白细胞细小病毒的第2引物对;所述第1引物对的碱基序列如SEQ ID No.1-2所示,所述第2引物对的碱基序列如SEQID No.3-4所示。
2.如权利要求1所述的病毒检测的检测试剂在制备病毒检测的检测药物中的应用。
3.如权利要求1所述的病毒检测的检测试剂在制备病毒检测的检测试剂盒中的应用。
4.病毒检测的检测试剂盒,其特征在于,所述检测试剂盒包括权利要求1所述的病毒检测的检测试剂。
5.根据权利要求4所述的病毒检测的检测试剂盒,其特征在于,至少还包括核酸释放剂、PCR预混缓冲液、DNA聚合酶和pMD18-T+ADV-VP2质粒阳性模板中的一种。
6.根据权利要求5所述的病毒检测的检测试剂盒,其特征在于,所述核酸释放剂包括0.4~0.6M的KOH和0.1%的Triton X-100。
7.根据权利要求5所述的病毒检测的检测试剂盒,其特征在于,所述PCR预混缓冲液为2×PCR预混缓冲液,所述2×PCR预混缓冲液包括20~30mM的Tris-HCl,8~10mM KCl,4~8mMMgCl2和0.4mM dNTPs,2mL/L Triton X-100。
8.根据权利要求7所述的病毒检测的检测试剂盒,其特征在于,所述Tris-HCl的pH值为7.0-7.3。
9.如权利要求4-8任一项所述的病毒检测的检测试剂盒在制备病毒检测的检测药物中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,包括以下步骤:
提取待检样本的基因组DNA,以所述基因组DNA为模板,设立PCR体系阳性模板对照和超纯水阴性对照,用检测阿留申病毒的第1引物对和检测猫泛白细胞细小病毒的第2引物对进行二联PCR反应,得到PCR反应产物,将所述PCR反应产物进行琼脂糖凝胶电泳检测。
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